$item.Name

首页>技术服务>分子生物学服务>分子生物学服务

质粒转化

型号
伊莱博生物科技(上海)有限公司

中级会员5年 

代理商

该企业相似产品

分子克隆与质粒载体构建

在线询价

甲基化检测实验

在线询价

稳转株筛选实验

在线询价

过表达慢病毒构建及包装实验服务

在线询价

荧光素酶实验

在线询价

分子实验-PCR

在线询价

实时荧光定量PCR实验

在线询价

RT-PCR实验

在线询价
免疫学;ELISA试剂盒,抗体,生化试剂,相关试剂。原代细胞,传代细胞,及培养试剂

伊莱博生物科技(上海)有限公司,公司总部位于上海长江软件园。2024年1月与上海大学医学院成立联合研究中心,主要以生命科学研究为基础,专注于研究成果转化及技术服务创新,建立了包含肿瘤生物学、病理学、免疫学、细胞生物学、生物化学与分子生物学以及动物实验等学科的研究服务体系,为医学领域的发展做出了重要贡献。


目前已建成并投入使用的实验室面积近2800平方米,包含基础实验平台、组学实验平台以及动物实验平台,基本能够满足科研课题研究的全流程。


伊莱博生物拥有专业的技术支持和实验操作人员团队,核心成员来自中科院、复旦、交大、同济等国内重点高校及科研机构,能够提供前沿的、完善的实验技术咨询与服务。


为了响应国家大力发展基础研究的号召,推动实验科学领域的进步,伊莱博生物充分利用积累多年的科研资源优势,为广大科研工作者提供实验技术培训服务,从理论和实操两个部分,培养其科研思维以及解决问题的能力,为今后的科研工作奠定坚实的基础。








详细信息

将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲击处理,促进细胞吸收 DNA 复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分lie增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子(即含有质粒 DNA 的细菌)。钙处理的感受态细胞,一般每微克 DNA 能获得 10 5 ~ 10 6 个转化子。除化学方法转化细菌外,还有电穿孔法( Electroporation ),其转化率可高达 10 9 ~ 10 10 个转化子 /μg 质粒 DNA 。

二、实验器材

1.培养皿

2.恒温培养箱

三、试剂

1.LB 培养基

2.选择性 LB 琼脂培养平板(含氨苄qms,终浓度为 50μg/ml )

3.氨苄qms 100 mg/ml

4.宿主细菌:经 100 mmol/L CaCl 2 处理的感受态细菌 DH5α

四、操作步骤

1、取50μL大肠杆菌感受态细胞,加入适量质粒(体积不得超过4μL)冰浴30min后42℃热激90s ,马上放回冰上,冰浴2min ;

2、加400μLLB培养基,于37℃摇床慢摇振荡培养45-60min;

3、取50-100μL涂在含有氨苄qms(100μg/mL)的LB固体培养基上,37℃倒置培养过夜。



相关技术文章

同类产品推荐

相关分类导航

产品参数

企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618
提示

请选择您要拨打的电话:

当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :