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北京市所在地
组织无机磷含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC2840
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三A | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三B | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂三A:临用前加入10mL蒸馏水溶解,用不完的试剂2-8℃保存4周;
试剂三B:临用前加入10mL蒸馏水溶解,用不完的试剂2-8℃保存4周;
试剂三:临用前按试剂三A:试剂三B:试剂二=1:1:1的体积比例配制,配好的试剂三应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,试剂三根据样本量现用现配,限当天使用。
标准品:10mmol/L磷标准液。
产品说明:
无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等,此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。
钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。
技术指标:
低检出限:0.0576 mmol/L
线性范围:0.0625-2 mmol/L
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
1、如果样本测定吸光值大于0.8,需用蒸馏水做相应稀释。如果样本测定吸光值较低或接近空白值,建议增大样本量后重新进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例:
取0.1g肝脏加入1mL试剂一,离心取上清之后按照测定步骤操作,测得A测定管=0.789,A空白管=0.016,A标准管=0.429,按样本质量计算无机磷含量得:
无机磷含量(mmol/g质量)=0.001×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
= 0.001×(0.789-0.016)÷(0.429-0.016)÷0.1= 0.019 mmol/g 质量
相关发表文献:
Bu J, Yu J, Wu Y, et al. Hyperlipidemia affects tight junctions and pump function in the corneal endothelium[J]. The American Journal of Pathology, 2020.
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