【精子形态学染色试剂盒（巴氏快速法）品    名】

精子五联检：精子形态学染色试剂盒（巴氏快速法）

【研发依据】

精液中正常形态精子所占比例越低，生育机会越低，而流产、胎儿发育不良、死胎的可能性就越大；来自辅助生殖技术的资料表明，精子畸形指数(sperm deformity index，SDI)与体外受精有关，SDI>1.6时，体外受精率降低；多重异常指数（the multiple anomalies index, MAI）和畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）与体内受精有关。世界卫生组织（WHO）指出：正常形态精子≤4%时，将对男性的生育能力产生明显影响。

【预期用途】

主要用于人类精子形态学染色，便于医生在显微镜下观察精子正常形态及计算缺陷精子比例，评价人类精子形态学质量。也可用于其它哺乳动物精子形态学检查。

【试剂特点】无须特殊仪器，简单、快速、准确。

【检验原理】

本染色方法系WHO推荐的巴氏染色法。因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而呈现不同的着色。胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。用本试剂盒可以评价人类精子形态学特征，也可用于其它哺乳动物精子形态学检查。

【组成成份】试剂配制的原料有：苏木素、伊红、磷钨酸、亮绿、冰醋酸和酒精等。

【样本要求】液化后的新鲜精液标本

【操作方法】

1. 标本准备

（1）新鲜精液标本*液化或贮存于-20℃的精液标本复温（室温）。

（2）需要对精子进行洗涤后制片，方法如下： ① 在试管内加入精液0.5ml和生理盐水10 ml，充分混匀。 ② 2000转离心10min，去掉大部分的上清液（必要时重复①②步骤）。 ③ 轻轻弹动试管使离心后的精子团悬浮于剩余的盐水中，若精子浓度过高，则以生理盐水适当调整精子密度。

2．检测步骤

（1）在一张洁净的载玻片上，加入10—20μl精液，并将其均匀涂成一个圆形样本区，涂制好的玻片水平放置，空气中自然干燥。

（2）将干燥后的涂片在95%乙醇溶液中固定5—10分钟。

（3）将已固定的涂片放入染液A中浸泡5分钟，水洗。

（4）将涂片浸入染液B中5-10秒，水洗2遍后浸泡于清水中2分钟。

（5）将涂片浸入95%乙醇2分钟。

（6）将涂片在染液C中浸泡3分钟，在95%乙醇中漂洗2次（各5—10秒）。干燥后滴加石蜡油（标本片如需长期保存则需用“中性树胶”封片），用光学显微镜观察至少200个精子，分类计数精子的形态。

【染色结果】

精子顶体区呈淡蓝色，头部非顶体区呈深蓝色，精子体尾部呈红色。

【参考值】

（1）WHO精子形态学分类标准  正常精子：头部椭圆形（大小正常，长宽之比1.50—1.75，顶体界限清晰，顶体占头部的40—70%），头、颈、中段和尾部都正常。

（2）缺陷精子分类如下：

精子多重缺陷指标的计算：①多重异常指数（the multiple anomalies index, MAI）：每个异常精子出现缺陷数的平均值，所有的头部、颈部和尾部的畸形都计算在内。②畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）：TZI与MAI相似，二者的区别在于TZI只记录每个精子的四种缺陷：头部、颈部、尾部及是否含有过大的残留胞浆小滴，而非每个异常精子的实际缺陷数量。③精子畸形指数(sperm deformity index，SDI)：缺陷的数目除以总精子数（而非只是异常精子数）。该指数可记录多种精子头部异常的情况，但颈部和尾部的缺陷仅作一次记录。

精子多重缺陷指标的计算方法举例如下：

（3）世界卫生组织（WHO）推荐正常参考值：正常形态精子﹥4%

【注意事项】

1、精子洗涤不充分将会影响显微镜观察。

2、受试者应按照WHO技术规范采集精液标本。

3、冬季染色时，如环境温度较低，染色液A、染色液C的染色时间可适当延长。

4、受检者所有样品均应视为潜在的传染源，检测完毕的样本、试剂、用具均须做为医疗废物处理，避免污染环境。

5、精子染色试剂盒为体外诊断试剂，检测结果仅供临床参考，对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况结合考虑。

【基本信息】

产品注册证号：闽明食药监械（准）字2013第1400021号

执行产品标准：YZB/闽明0033-2013

医疗器械生产企业许可证号：闽食药管械生产许第20110297号

包装规格：30ml×6瓶/盒、100ml×3瓶/盒、250ml×3瓶/盒、500ml×3瓶/盒

存储条件及有效期：试剂盒于4-28℃避光保存，有效期12个月。

【附录】

影响精子受精或男性不育的因素

1.精子死亡率过高

2.精子畸形率过高

3.精子成熟率过低

4.精子染色体异常

5.精子数量过少

6.精子活动力过低

7.精子液化能力过低

——生殖医学检测试剂盒系列

1、精子DNA检测试剂盒

2、精子DNA碎片检测试剂盒

3、精子活性检测试剂盒

4、精子形态学检测试剂盒

5、精子核蛋白检测试剂盒

五项联合检测，诊断分析精子的受精及生育能力，无须仪器，简单、快速、准确，不孕_不育科的*诊断方案。