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原代细胞培养：
原代细胞（Primary cells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指：组织器官、外周血及胚胎等。
原代细胞培养：由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。所以一般认为：培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
公司产品仅供科研研究实验
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 大鼠肺成纤维细胞 |
组织来源 | 肺组织 |
商品货号 | A01X1524 |
种属来源 | 大鼠 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 大鼠肺成纤维细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁wan全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺器官的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 |
包被条件 | |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
传代特性 | 可传5代左右；3代以内状态最佳 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
具体步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通。
公司正在出售的产品：
大鼠肾小球系膜细胞 | 白栖东海菌Donghicola eburneus |
大鼠肾足突细胞 | 河口弧菌Vibrio aestuarianus |
大鼠食管平滑肌细胞 | 潮汐希瓦氏菌Shewanella gaetbuli |
大鼠食管上皮细胞 | 卡尔维湾弧菌Enterovibrio calviensis |
大鼠视乳头星形胶质细胞 | 波罗的海希瓦氏菌Shewanella baltica |
大鼠视网膜Muller细胞 | 东海大洋球形菌Oceanisphaera donghaensis |
大鼠视网膜色素上皮细胞 | 塔斯曼尼亚弧菌Vibrio tasmaniensis |
大鼠视网膜神经节细胞 | 灿烂弧菌Vibrio splendidus |
大鼠视网膜微血管内皮细胞 | 海绵假交替单胞菌Pseudoalteromonas spongiae |
大鼠输尿管上皮细胞 | 嗜丝氨副球菌Paracoccus seriniphilus |
大鼠胎盘间充质干细胞 | 欧文斯氏弧菌Vibrio owensii |
大鼠外周血白细胞 | 强壮芽胞杆菌Bacillus fortis |
大鼠外周血单个核细胞 | 大鼠肺成纤维细胞假坚强芽胞杆菌Bacillus pseudofirmus |
大鼠外周血中性粒细胞 | 盐反硝化枝芽孢杆菌Virgibacillus halodenitrificans |
大鼠微血管周细胞 | 井水假芽胞杆菌Fictibacillus rigui |
