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原代细胞培养：
原代细胞（Primary cells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指：组织器官、外周血及胚胎等。
原代细胞培养：由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。所以一般认为：培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
公司产品仅供科研研究实验
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 小鼠肝外胆管上皮细胞 |
组织来源 | 胆管组织 |
商品货号 | A01X1814 |
种属来源 | 小鼠 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 小鼠肝外胆管上皮细胞分离自肝外胆管组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。临床上常见的胆管病变如胆道闭锁、先天性胆总管囊肿、原发性硬化性胆管炎等，都是以胆管上皮细胞为病变的靶位，引起胆管上皮的损伤。了解正常胆管上皮细胞的生物学特征和病变胆管上皮细胞的病理生理学特征对研究胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。 |
包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
传代特性 | 可传1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
具体步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通。
公司正在出售的产品：
人结肠癌细胞；RKO | 包姜氏培养基（不含琼脂） |
人结肠癌细胞；CW-2 | Bordet-Gengou Medium |
人结直肠腺癌上皮细胞；DLD-1 | 包姜氏琼脂培养基 |
小鼠肺癌细胞；LLC | Bordet-Gengou Agar Medium |
人乳腺癌细胞；HS578T | 葡萄糖天门冬素培养基 |
人肝癌细胞；PLC/PRF/5 | Glucose Asparagine Medium |
人肝胆管癌细胞；RBE | AHM鉴别培养基 |
人肝腹水腺癌细胞；SK-HEP-1 | AHM Medium |
人胆囊癌细胞；GBC-SD | 10%NaCl卵黄乳液 |
人肝癌细胞；Li-7 | GC琼脂 |
人肝癌细胞；HuH-7 | GC Agar Base |
人多发性骨髓瘤细胞；ARD | 改良GAM琼脂抑菌剂 |
人多发性骨髓瘤细胞；AMO-1 | 小鼠肝外胆管上皮细胞高盐度脑心浸液肉汤 |
人多发性骨髓瘤细胞；KMS-11 | 胰蛋白胨大豆琼脂 |
人多发性骨髓瘤细胞；U266 | Tryptose Soya Agar |
