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上海市所在地
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
微量法 | 100管/96样 | AS6321376 |
商品介绍:
商品介绍 测定意义: 丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖异生过程的第一个限速酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。 测定原理: PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm下测定NADH氧化速率,即可反映PC活性 需自备的仪器和用品: 分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
平菇胰辅脂抗体Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羟甲基戊二单酰还原(HMG-CoAR)免疫试剂盒
螺卷毛壳19号染色体开放阅读框45抗体Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羟甲基戊二单酰(HMG-CoA)免疫试剂盒
鲜绿青霉过氧化氢诱导转录蛋白1抗体Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羟基赖正己(HLNL)免疫试剂盒
酿酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗体Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羟脯(Hyp)免疫试剂盒
米曲霉第12号染色体开放阅读框23抗体Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人强啡肽(Dyn)免疫试剂盒
酿酒酵母γ-连环/连接蛋白γ抗体Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)免疫试剂盒
日勾维肠杆菌10号染色体开放阅读框4抗体Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潜伏膜蛋白1(LMP-1)免疫试剂盒
中国克鲁维酵母10号染色体开放阅读框47抗体Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人前心钠肽(Pro-ANP)免疫试剂盒
黄色短杆菌10号染色体开放阅读框81抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纤维蛋白1抗体免疫试剂盒
猴头菌19号染色体开放阅读框47抗体Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纤维蛋白1免疫试剂盒
金黄壳囊孢19号染色体开放阅读框54抗体Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前铁调(Pro-Hepc)免疫试剂盒
贝雷丝孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖转移1抗体Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫试剂盒
球孢白僵菌19号染色体开放阅读框18抗体Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫试剂盒
总状毛霉19号染色体开放阅读框21抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫试剂盒
沼泽红假单胞菌19号染色体开放阅读框24抗体Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙抗体Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫试剂盒
葡萄穗霉属Stachybotrys│sp. 质量规格:>98%,BRB连接蛋白试剂盒橙花
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BRB活化因子受体试剂盒长梗秦艽
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BRB活化因子试剂盒常山乙
丙酮酸羧化酶(PC)测试盒100管/96样史氏芽孢杆 2,5-二苯肼盐酸盐磷酸化钙调依赖性蛋白激2Elisa
Erwinia persicina 2-溴苯肼盐酸盐红生成受体Elisa
头状茎点霉 5-氨基-2-甲轻脂酞辅脱氢Elisa
金针菇 Dichlorobis(2-(二苯基膦)乙)钌(II)ATP合成Elisa
顶黑毛壳 4-溴-2,3-二甲核因子κB抑制物激Elisa
出芽短梗霉(黑酵母) 花生酸舒缓激肽Elisa
大豆慢生根瘤 花生酸痢疾密螺旋体Elisa
酿酒酵母 2,凝血原Elisa
柠檬两面神 5-氟-2-缺氧诱导因子Elisa
米根霉 高哌唾液淀粉α1Elisa
枯草芽孢杆 10-溴癸酸IIA分泌型磷脂A2Elisa
健康皮张抗原(兔皮A) 2,4,6-三氟异酸苯酯烟酰腺二核苷酸Elisa
锁掷酵母 3-氟-4-(甲氧基羰基)苯酸20-羟化二十碳四烯酸Elisa
酿酒酵母 2-溴-5-(三氟甲基)吡啶糖原合成激3Elisa
阴沟肠杆 4-氨基肉桂酸乙酯巨噬来源的趋化因子22Elisa
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。