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上海市所在地
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 β-GD广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。 测定原理 β-GD催化ben酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的ben酚,通过测定ben酚含量反应该酶活性高低。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321252 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
肉桂(标准品)英文名: Cephalotaxlen磷化肌球蛋白磷抗体包装25g
肉桂(标准品)英文名: Araloside Ⅹ磷化肝生长因子受体(原癌基因)抗体包装5g
肉桂(标准品)英文名: Glucosamine sulfate丝裂原活化蛋白激MKK6抗体包装1g
肉桂(标准品)英文名: Coptisine Sulfate磷化丝裂原活化蛋白激MKK3/6抗体包装25g
肉桂叶(标准品)英文名: Chondroitin sulfate磷化丝裂原活化蛋白激MKK6抗体包装5g
乳香(标准品)英文名: Gentiopicroside嗜粒趋化蛋白22抗体包装1g
瑞香/祖师麻(标准品)英文名: Aloin硫脑啡肽抗体包装5g
塞骨(标准品)英文名: Aloin抗体包装1g
噻二(标准品)英文名: Aloenin基质金属蛋白9抗体包装25g
噻二苷(标准品)英文名: Gramine原癌基因M-ras抗体包装5g
赛门苷I(标准品)英文名: Ruscogenin单核趋化蛋白1抗体包装5g
三白草(标准品)英文名: Chlorogenic acid抗体包装1g
三白草(标准品)英文名: Chlorogenic acid鸡支原体抗体包装5g
三叉苦(标准品)英文名: Nitidine chloride线粒体转录因子1抗体包装1g
三尖杉碱(标准品)英文名: Cyanidin Chloride有丝分裂抑制缺陷蛋白1抗体包装500mg
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 质量规格:HPLC>99%,标准品抗蛋白3抗体IgG试剂盒对羟基肉桂;p-Hydroxy-cin
佩特曲霉Aspergillus│petrakii 质量规格:HPLC>95.0%,BR抗单链DNA试剂盒蛋;L-Methionine
嗜肺巴氏杆菌Pasteurella│pneumotropica 质量规格:HPLC>98.0%,标准品抗单核抗体试剂盒对伞花烃;4-Isopropyltolu
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)测试盒50管/48样樊庆生氏红球 反式-4-乙基-(1,1-联二环己烷)-4-甲酸二氧化Elisa
泛属 4-甲基水杨酰二磷酸腺苷Elisa
酿酒酵母 7-溴喹啉二酰基甘油Elisa
发酵毕赤酵母 6-吡啶-3-羧酸乙酯繁殖与呼吸综合征病抗体Elisa
海生红球 4-基苯磺酰芳香化Elisa
pGEX-5X-3 4-溴-3-氟甲酯芳香烃受体Elisa
贝伦格葡萄座腔梨生专化型 2,5-二氟苄酯化脂肪酸Elisa
Enterobacter ludwigii Hoffmann 3,4-二甲氧苯肺表面活性物质相关蛋白AElisa
黄曲霉 3-硫脲肺表面活性物质相关蛋白CElisa
娄彻链霉 2-氟-3-甲酰基苯酸肺表面活性物质相关蛋白DElisa
海洋杆 4-乙基苯硫肺炎支原体抗体Elisa
糖多孢 4-吡咯并[2,3-D]嘧啶分泌型磷脂A2Elisa
地衣芽孢杆 2-乙基-3-羟基-4-吡喃酮分泌型球蛋白AElisa
博戈里亚假丝酵母 1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸分泌型球蛋白MElisa
变异链霉 噻吨-9-酮封闭蛋白1Elisa