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商品介绍:
测定意义: AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。 测定原理: 在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与4-氨基安替bi林和铁氰hua钾反应红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510 nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。 自备仪器和用品: 紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321124 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
性红 73(标准品)英文名: *磷化D酪激衰减蛋白1抗体包装1g
林钠(标准品)英文名: N-Acetyl Neuraminic Acid/NANA/Neu5Ac/SA磷化Fas相关死亡结构域蛋白抗体包装100g
羧司坦(标准品)英文名: Erythromycin磷化D酪激衰减蛋白1抗体包装500g
他克莫司(标准品)英文名: Erythromycin磷化Fas相关死亡结构域蛋白抗体包装100g
他扎罗(标准品)英文名: Dobutamine HCL磷化Fas相关死亡结构域蛋白抗体包装25g
标准品)英文名: HPCD磷化Fas相关死亡结构域蛋白抗体包装100ml
(标准品)英文名: Carboxymethyl chitosan磷化DNA基转移1抗体包装500ml
泰诺福韦;韦(标准品)英文名: Enoxaparin sodium磷化DNA基转移1抗体包装100ml
(标准品)英文名: Enoxaparin sodium磷化DNA基转移1抗体包装500ml
坦度替尼(标准品)英文名: Trimebutine maleate7脱氢胆固还原抗体包装1g
碳钙(标准品)英文名: Heparin sodium大脑发育同源蛋白2抗体包装5g
糖精(标准品)英文名: HE-β-CD退行性精母同源物1抗体包装1g
特比萘芬(标准品)英文名: Nefopam HClDSCC1蛋白抗体包装1g
特那定(标准品)英文名: Methotrexate disodium 诱捕受体2抗体包装100g
替比夫定(标准品)英文名: Methotrexate disodium DNA基转移相关蛋白1抗体包装25g
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:HPLC≥98%,标准品尾肢同源蛋白2试剂盒山椒子烯;Zeylenone
: HBUM171309资源名称: 链霉菌 质量规格:>99%,BR尾加压Ⅱ 1,3,5,8-四羟基山;1,3,5,
慢生根瘤菌(豇豆族)Bradyrhizobium│sp. 质量规格:>98%,USP30,BR维生K依赖蛋白Z试剂盒三油甘油酯;Triolein
碱性磷酸酶(AKP/ALP)测试盒100管/48样枯草芽孢杆 1-苯基-1,3-丁二酮5-甲基四氢高半胱甲基转移Elisa
绿僵 2,6-二 N-氧化物可提取核抗原Elisa
热带假丝酵母 N-甲基-N-苯骨成型蛋白9Elisa
爪哇毛霉 1,4-二甲基吡唑雌马Elisa
嗜腐烂居真细 2-(4-羟基苯基)酸透明质酸Elisa
茄链格孢 1,1,1,3-四烷α酮戊二酸Elisa
周雄腐霉 2-氨基苯并噻唑-6-甲酸母亲DPP同源物4Elisa
哈茨木霉 2-对苯二硫酸盐视网膜母瘤蛋白1Elisa
水生恩氏 阿德福韦性T相关抗原Elisa
粉红单端孢 乙酰肼硫脂Elisa
Homoserinimonas (Z)-N,N-二(2-羟基乙基)-9-十八烯酸酰抗髓鞘相关糖蛋白抗体Elisa
黄曲霉 2-羟基-4′-(2-羟乙氧基)-2-酮结缔组织活化肽ⅢElisa
枯草芽孢杆 膦酰基乙酸甲酯二乙酯核受体亚家族3C组成员1Elisa
芽胞杆属 8-甲氧基喹啉什曼病Elisa
米根霉 N-(叔丁氧羰基)-D-赖类风湿因子IgM抗体Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。