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上海市所在地
公司产品仅供科研使用:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
紫外分光光度法 | 50管/24样 | AS6321379 |
商品介绍:
商品介绍 测定意义: 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。 测定原理: GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次)8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
产品优点如下:
1、快速简便:双试剂,直接操作,快速、简便。
2、取样量微:需要的样本量是羟胺法的1/10。
3、灵敏度高:检测线0.5U/ml,是羟胺法5倍,邻苯三酚法的200倍
4、稳定性好:批内CV=5.50%,批间CV=3.32%,试剂盒2~8℃存放3个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.2%。6、回收试验: X =102.3%。7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。且特异性强,不受类SOD物质的干扰8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
副鸡嗜血杆菌结合转化激活因子CITED1抗体Human EPYC(Epiphycan) ELISA Kit人膜内酰基肽(ANPEP)免疫试剂盒
蜡样芽孢杆菌Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙抗体Human EFNA5(Ephrin A5) ELISA Kit人膜联蛋白A2(ANXA2/ANX2/ANX2L4/CAL1H/LPC2D)抗体免疫试剂盒
耐辐射奇球菌CSMD2蛋白抗体Human ERα(Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅶ(ANX-Ⅶ)免疫试剂盒
阿华蜡孔菌CSMD3蛋白抗体Human EFNA4(Ephrin A4) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅵ(ANX-Ⅵ)免疫试剂盒
金耳钙调神经磷CSTP1抗体Human ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗体(IgM)免疫试剂盒
酿酒酵母CTAGE6蛋白抗体Human EL/LIPG(Endothelial Lipase) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)抗体(IgG)免疫试剂盒
苔原弯颈霉皮肤T淋巴瘤相关抗原4抗体Human EFNA5(Ephrin A5) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫试剂盒
葛氏沙雷氏菌膜蛋白CLDND2抗体Human ELA2B(Elastase 2B) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)免疫试剂盒
胶红酵母含半胱和组丰富域蛋白1抗体Human Des(Desmin) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅲ(ANX-Ⅲ)免疫试剂盒
嗜热假诺氏菌猪圆环病Ⅱ型衣壳蛋白Human ELA3B(Elastase 3B) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅱ(ANX-Ⅱ)免疫试剂盒
大豆慢生根瘤菌抗菌肽CAMP抗体Human DHEA-S(Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit人膜联蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)免疫试剂盒
酿酒酵母卷曲螺旋结构域蛋白134抗体Human DPD(Deoxypyridinoline) ELISA Kit人膜结合型IgM(mIgM)免疫试剂盒
人苍白杆菌卷曲螺旋结构域蛋白69抗体Human DPT(Dermatopontin) ELISA Kit人膜攻击复合物(MAC)免疫试剂盒
节杆菌卷曲螺旋结构域蛋白98抗体Human DPP6(Dipeptidyl Peptidase VI) ELISA Kit人膜辅蛋白(MCP/CD46)免疫试剂盒
红细菌卷曲螺旋结构域蛋白70抗体Human DLD(Dihydrolipoyl Dehydrogenase) ELISA Kit人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激(AMH)免疫试剂盒
镰孢霉卷曲螺旋结构域蛋白51抗体Human DR-70TM(Tumor Marker DR-70 For Lung Cancer) ELISA Kit人苗条受体(LR/Ob-R)免疫试剂盒
虫拟蜡菌Ceriporiopsis│subvermispora 质量规格:D,99.96%Alpha-D /维生E试剂盒橙黄Ⅱ
轮枝菌Verticillium│sp. 质量规格:D,99.9%alpha-1肾上腺能受体试剂盒橙黄Ⅰ
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:D,99.9%AFG3样蛋白2试剂盒雌
糖原磷酸化酶b(GPb)测试盒50管/24样詹氏酸杆 托法替尼8-氧鸟脱氧核苷Elisa
无药品 需氧总数 3--5-(三氟甲基)苯甲波形蛋白Elisa
酿酒酵母 7-甲基-3-甲鸟氨酰转移Elisa
Maribius salinus 6-甲基-3-甲肌间线蛋白Elisa
鸡伤寒沙门氏 4-硝基甘油-3-磷酸脱氢Elisa
大肠埃希氏 6-硝基碱性成纤维生长因子2Elisa
酿酒酵母 N-叔丁氧羰基-O-(2-溴苄氧羰基)-L-酪辅脂Elisa
斯托克青霉 1-Boc-3-基吡咯烷脯氨酰羟化Elisa
双歧双歧杆 Isotretinoin心血管调节肽Salusin-α抗体Elisa
梅氏弧 4-二甲氨基苯甲酰心血管调节肽Salusin-β抗体Elisa
总状共头霉 1,4-二酞纤维蛋白原γ链Elisa
果生链核盘 Sorafenib Tosylate一氧化氮合Elisa
纤维単胞 N-Boc-5-溴-2-酸抗中性粒核周抗体Elisa
阿姆斯特丹曲霉 (S)-3-羟基盐酸盐白三烯E4Elisa
腐皮镰孢 4-乙基苯甲抗小肠杯状抗体Elisa
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。