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生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品分类:核酸杂交
储存条件:室温,24个月
用途:杂交缓冲液
注意事项:其终浓度为:氯化钠3M,磷酸二氢钠0.2M、EDTA0.02M。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
SSPE缓冲粉剂 | 1L | FS-R7395 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
短密青霉肌球蛋白轻链激抗体Human PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit磷化乙酰(PaCoA)
大肠埃希氏杆菌MYCBPAP抗体Human IMPA2(Inositol monophosphatase 2) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)
香菇组织相容性复合体蛋白1抗体Human CARTPT(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript protein) ELISA Kit磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)
扩散炭层菌线粒体核糖体蛋白S22抗体Human COL1A1(Collagen Type I Alpha 1) ELISA Kit磷化外信号调节激(pERK)
毛栓孔菌棕榈酰化膜蛋白7抗体Human PTTG2(Securin-2) ELISA Kit磷化糖原合激3β(pGSK3B)
泡囊短波单胞菌小鼠抗单克抗体Human COL2A1(Collagen alpha-1(II) chain) ELISA Kit磷化糖原合成激3(pGSK-3)
乳乳球菌乳亚种肌球蛋白轻链1/3抗体Human PTTG1IP(Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein) ELISA Kit磷化肌球蛋白轻链(PMLC)
葡萄座腔菌属磷化肌球蛋白轻链抗体Human NUSAP1(Nucleolar and spindle-associated protein 1) ELISA Kit磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)
大肠埃希菌肌肉特异性泛蛋白连接1抗体Human OxLDL(Oxidized low-density lipoprotein) ELISA Kit磷化蛋白激C(P-PKC)
产气列契瓦尔氏菌泛蛋白连接抗体Human PIIINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(III) chain) ELISA Kit磷化蛋白激B(P-PKB)
大肠埃希菌单羧转运蛋白2抗体Human MYOCD(Myocardin) ELISA Kit磷化cAMP反应元件结合蛋白1(pCREB1)
芬青霉可溶性苹果脱氢抗体Human NRN1(Neuritin) ELISA Kit磷甘油变位2(PGAM2)
云芝栓孔菌(变色栓菌)蛋白激C亚性D型抗体Human MITF(Microphthalmia-associated transcription factor) ELISA Kit淋巴趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)
枝孢属磷化µ-型受体抗体Human LMAN2(Vesicular integral-membrane protein VIP36) ELISA Kit淋巴抗原6复合物基因座A(Ly6a)
链霉菌磷化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体Human MDH2(Malate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit淋巴功能相关抗原3(LFA-3/CD58)
酿酒酵母基质金属蛋白9抗体Human MMP17(Matrix metalloproteinase-17) ELISA Kit淋巴功能相关抗原2(LFA-2/CD2)
澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 质量规格:>98%,BR盐甜菜碱
淡紫拟青霉(新引种)Paecilomyces lilacinus 质量规格:粘度100000mPa.s甜菜碱
: SK1023/61资源名称: 坎德沙门氏菌 质量规格:4000mPa.s,BR鼠李糖
SSPE缓冲粉剂Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit 小鼠细胞周期suD3规格: 48T
Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠细胞周期suD2规格: 48T
E(Mouse estrogen) ELISA Kit 小鼠雌激su规格: 48T
Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit 小鼠细胞周期suD1规格: 48T
MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit 小鼠髓磷脂性蛋白规格: 48T