SSPE缓冲粉剂
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参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-08-30 10:23:35
284
属性:
供货周期:现货;规格:1L;货号:FS-R7395;应用领域:化工;主要用途:仅供科研;货号:FS-R7395;
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产品属性
供货周期
现货
规格
1L
货号
FS-R7395
应用领域
化工
主要用途
仅供科研
货号
FS-R7395
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

SSPE缓冲粉剂公司正在销售的产品:Anti-RGS5 Antibody小鼠性休克综合征素1
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Anti-RGS5 Antibody小鼠补体1抑制物抗体
Anti-RHAG Antibody人血管紧张素Ⅰ受体抗体
Anti-RHD

详细介绍

63.jpg
产品分类:核酸杂交

储存条件:室温,24个月

用途:杂交缓冲液

注意事项:其终浓度为:氯化钠3M,磷酸二氢钠0.2M、EDTA0.02M。

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!

产品名称

规格

货号

SSPE缓冲粉剂

1L

FS-R7395

 

配制与标定的实验原理:

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。

配制步骤:

1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。

13.jpg 

 

实验方法与判定:

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。

3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法:

1.  常用筛选浓度

注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。

1)  第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2)  根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3)  第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4)  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5)  按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1)  转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。

注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2)  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3)  筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。

4)   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5)   之后更换正常培养基培养即可。

短密青霉肌球蛋白轻链激抗体Human PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit磷化乙酰(PaCoA)

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链霉菌磷化丝裂原活化蛋白激激1/2抗体Human MDH2(Malate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA Kit淋巴功能相关抗原3(LFA-3/CD58)

酿酒酵母基质金属蛋白9抗体Human MMP17(Matrix metalloproteinase-17) ELISA Kit淋巴功能相关抗原2(LFA-2/CD2)

澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 质量规格:>98%,BR盐甜菜碱

淡紫拟青霉(新引种)Paecilomyces lilacinus 质量规格:粘度100000mPa.s甜菜碱

: SK1023/61资源名称: 坎德沙门氏菌 质量规格:4000mPa.s,BR鼠李糖
SSPE缓冲粉剂Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD3规格: 48T

Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD2规格: 48T

E(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激su规格: 48T

Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠细胞周期suD1规格: 48T

MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit  小鼠髓磷脂性蛋白规格: 48T

 


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