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试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可在氧气存在下,直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生,而且与免疫反应密切相关。 测定原理 NOX能够将NADH氧化为NAD,NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝(DCPIP)的还原相偶联,蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP,在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS63217 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
细胞周期D2(Cyclin-D2)英文名:Cyclin-D2 ELISA KitAICAR酰基转移抗体包装5MG
细胞周期D1(Cyclin-D1)英文名:Cyclin-D1 ELISA Kit磷化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体包装1g
细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)英文名:SOCS-3 ELISA KitATP5E蛋白抗体包装250mg
细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)英文名:SOCS-1 ELISA KitATP5G2蛋白抗体包装25g
细胞外信号调节激(ERK)英文名:ERK ELISA KitATP6V0D2蛋白抗体包装5g
C(Cyt-C)英文名:Cyt-C ELISA KitATP6V1B2蛋白抗体包装1g
细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)英文名:CYFRA21-1 ELISA KitATPIF1蛋白抗体包装5g
细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)英文名:CK 18-M65 ELISA KitAttractin蛋白抗体包装10mg
细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)英文名:CK 18-M30 ELISA Kit磷化有丝分裂激B抗体包装50mg
细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)英文名:ICAM-3/CD50 ELISA Kit肌动蛋白相关蛋白M1抗体包装100mg
细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)英文名:ICAM-2/CD102 ELISA KitALKB蛋白抗体包装1g
细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)英文名:ICAM-1/CD54 ELISA Kit乙酰酰基转移1抗体包装5g
细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)英文名:CTLA-4/CD152 ELISA Kit磷化β-肌动蛋白抗体包装250g
硒蛋白M(SELM)英文名:SELM ELISA Kit磷化肾上腺能受体β2/β2-AR 抗体包装25g
戊糖(Pentosidine)英文名:Pentosidine ELISA Kit磷化肾上腺能受体β2/β2-AR抗体包装5g
激活受体相互作用蛋白1抗体白介6(IL6)RTA-408 是一种抗氧化炎症调节剂 (AIM),可激活 Nrf2 并抑制一氧化氮 (NO)。RTA-408 通过抑制 STING 依赖的
NADH氧化酶(NOX)测试盒50管/48样黑紫红菇 间羟基苯酮Rho关联含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
葡萄座腔属 三氟酮酸甲酯Rho关联含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
传染性喉气管炎病 1-[2-氨基-1-(4-甲氧基苯基)乙基]环己盐酸盐Rho关联含卷曲螺旋蛋白激5Elisa
齿双歧杆 1,8-萘内酰亚RNA结合基序蛋白6Elisa
枯草芽孢杆 N-Fmoc-L-天冬-1-叔丁酯RNA聚合转录终止因子ⅠElisa
副猪嗜血杆 1,1'-二茂铁甲酸R-脊椎蛋白2Elisa
粪产碱粪亚种 3-甲硫基苯酸S100A11钙结合蛋白Elisa
小孢根霉华变种 敌百亩/二甲基二硫代钠二水合物S100A12钙结合蛋白Elisa
根瘤 二茂铁甲S100A14钙结合蛋白Elisa
嗜热脂肪地芽孢杆 蔗糖酯S100钙结合蛋白BElisa
枯草芽孢杆 S-100蛋白Elisa
矩圆黑盘孢 十四烷酸乙酯S100钙结合蛋白A8;A9复合物Elisa
鲑色锁掷酵母 间苯二异酸酯S100钙结合蛋白A9Elisa
肠道致病性大肠埃希氏 3,5-二氟苯乙酮Salusinα蛋白Elisa
梭 SAX1蛋白Elisa