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滨州市所在地
植物DNA核酸免提取试剂盒
试剂盒应用
本试剂盒采用zhuan利裂解液配方在10分钟内完成植物叶片、根、茎、花蕊、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包括水稻、玉米、小麦、油菜等作物。整个提取过无需使用蛋白酶K等酶类制剂。提取DNA可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文库构建等。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
试剂盒组成
组分 | Col-D0201(50T) | 编号 |
裂解液DP | 35 mL | Col-D0201A |
洗涤液DWA | 25 mL | Col-D0201B |
洗涤液DWB | 12 mL | Col-D0201C |
洗脱液P | 5 mL | |
DNA吸附柱 | 50套 | Col-D0201E |
备注:第一次使用前,在洗涤液DWB中加入48mL无水乙醇,并标记“√”和时间,避免重复加入。
保存条件
室温保存一年。
自备材料
水浴锅或金属浴、无水乙醇、无DNase和无RNase离心管、RNaseA(10mg/mL,或货号QR0101)
使用方法
1. 20-100mg新鲜植物样本经过液氮研磨后,加入700μL裂解液DP,涡旋30秒。
2. 55℃孵育1分钟。
备注:淀粉含量高,例如马铃薯等直接进行步骤3。
3. 12,000rpm离心1分钟,吸取500μL上清液。
4. (选做)加入5μL RNase A(10mg/mL),室温静置5-10分钟。
5. 加入250μL无水乙醇,上下颠倒混匀。
6. 全部加入DNA吸附柱中,12,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液。
7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗涤液DWA,12,000rpm离心30秒,倒掉收集管中废液。
8. 向DNA吸附柱中加入500μL洗涤液DWB,12,000rpm离心30秒,倒掉收集管中废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 12,000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。
11. 将DNA吸附柱放入新无DNase和无RNase离心管中,加入30-50μL洗脱液P,室温放置1分钟。
12. 12,000rpm离心2分钟,得到DNA溶液,-80℃保存。
注意事项
1. 经常更换手套,防止DNA污染。
2. 使用无DNase无RNase的吸头和离心管,防止DNA降解。
3. 常更换吸头,防止交叉污染。
4. 动作轻柔,防止基因组DNA断裂。
5. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液P置于65℃水浴后再使用。