植物RNA核酸免提取试剂盒（多糖多酚类）

试剂盒应用

本试剂盒采用专门针对多糖多酚类植物样本开发的裂解液PP，在10分钟内完成植物叶片、根、茎、花蕊、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包括棉花、马铃薯、铁皮石斛等。整个提取无需使用蛋白酶K等酶类制剂。该配方中含有RNA保护剂，能够抑制RNA降解、保护RNA完整，从而提高产量。提取RNA可用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

备注：第一次使用前，在洗涤液PWB中加入48mL无水乙醇，并标记“√”和时间，避免重复加入。

保存条件

室温保存一年。

自备材料

水浴锅或金属浴、无水乙醇、1.5mL无RNase离心管、β-巯基乙醇、DNase I（2U/μL，或货号QR0102）

使用方法

1. 20-100mg新鲜植物样本经过液氮研磨后，加入700μL裂解液PP和35μLβ-巯基乙醇，涡旋30秒。

2. 55℃孵育1分钟。

备注：淀粉含量高的样本直接进行步骤3。

3. 12,000rpm离心1分钟，吸取500μL上清液。

4. 加入250μL无水乙醇，上下颠倒混匀。

5. 全部加入RNA吸附柱中，12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液。

6. 向RNA吸附柱中加入500μL洗涤液PWA，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

7. 向RNA吸附柱中加入500μL洗涤液PWB，12,000rpm离心30秒，倒掉收集管中废液。

8. 重复步骤7一次。

9. 12,000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。

10. 将RNA吸附柱放入新1.5mL无RNase离心管，加入30-50μL 洗脱液P，室温放置1分钟。 

11. 12,000rpm离心2分钟，得到RNA溶液，-80℃保存。

注意事项

1. 务必在超净台中进行操作，常换手套，防止RNA降解。

2. 尽可能使用新鲜样本进行RNA提取。

3. 使用无DNase无RNase的吸头和离心管，防止RNA降解，常更换吸头，防止交叉污染。

4. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液PP置于65℃水浴后再使用。

5. 根据后续试验需求，请使用DNase I（货号QR0102）进行基因组清除。

常见问题解析