PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

20411ES01PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

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2022-02-10 11:53:27
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供货周期:现货;规格:15000 U;货号:20411ES01;应用领域:医疗卫生,生物产业;
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现货
规格
15000 U
货号
20411ES01
应用领域
医疗卫生,生物产业
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖,及杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。

详细介绍

PNGase F N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

 

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

20411ES01

15000 U

763

PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

20411ES02

75000 U

3373

 

产品描述

N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,并在 E. coli大肠杆菌中重组表达,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品常应用于抗体及其相关蛋白*去糖基化。

 

产品性质

中文别名(Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

大肠杆菌表达

纯度(Purity)

经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 90%

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性Specific activity

1,800,000 U/mg

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol.

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从

10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

运输和保存方法

干冰运输;-20℃保存;有效期12个月。

 

使用方法

1、变性条件下蛋白质去糖基化:

1将1μL 5%SDS和1μL 1 M DTT加入到12 μL目标糖蛋白(50 μg),总体积14 μL;

2100℃温度下煮沸10 min使其变性,室温冷却5 min;

3加入2 μL的0.5M磷酸钠缓冲液(pH 7.5)。如果pH在PNGase F(pH 6-10)范围内,可以使用其他缓冲液。20 mL 0.5 M磷酸钠(调制pH 7.5)的配置: 8.4 mL 1 M Na2HPO4,1.6 mL 1 M NaH2PO4 。

4加入2 μL的10%NP-40。可用Triton X-100替代NP-40。PNGase F 的活性受 SDS 的抑制,所以在反应混合物中必须加入 NP-40

5加入1-2 μL的PNGase,在37℃孵育1-3 h。

2、非变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在50 mM碳酸氢铵(pH 7.8)中加入20 μg的糖蛋白至终体积为18μL;

2)加入1-2 μL的PNGase F,在37°C孵育2-18 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。具体酶浓度见管壁标签

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

HB210129

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