线性PEI转染试剂 聚乙烯亚胺 MW25000

线性PEI转染试剂 聚乙烯亚胺 MW25000

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3155 1

具体成交价以合同协议为准
2023-02-22 16:07:11
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供货周期:现货;规格:1g;货号:40815ES03;应用领域:生物产业;
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供货周期
现货
规格
1g
货号
40815ES03
应用领域
生物产业
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

线性PEI转染试剂 聚乙烯亚胺 MW25000即PEI 25K是一种瞬时转染试剂,其功能强大且经济实惠,在HEK293和CHO表达系统中,能在96孔板至100L生物反应器范围内提供始终如一高效的基因表达。因此越来越多的研究人员和公司使用PEI来替代其他类型转染试剂,以获得他们所需要的优势,相较于其他类型转染试剂,使用自行制备的PEI转染试剂可以使总转染成本降低高达40%左右。

详细介绍

Polyethylenimine, Linear, MW 25000, Transfection Grade (PEI 25000)

线性PEI转染试剂 聚乙烯亚胺 MW25000


产品描述
 

线性PEI转染试剂 聚乙烯亚胺 MW25000是一种高电荷阳离子聚合物非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物,并使该复合物进入细胞中。该转染试剂是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等。该试剂与含血清的培养基兼容,能高效的将核酸导入细胞。


产品性质
 

中文名(Chinese Name

线性聚乙烯亚胺PEI 25000

英文名(English Name

Polyethylenimine Linear (PEI) MW25000 

CAS号(CAS No.)

9002-98-6, 26913-06-4

分子式(Molecular formula)

(CH2CH2NH)n

分子量(Molecular weight)

25,000

外观(Appearance)

白色至黄色固体

熔点(Melting Point)

73~75 ℃

溶解性(Solubility)

溶于热水,低pH冷水,甲醇和乙醇。不溶于苯和丙酮

结构式(Structure)

图片.png
 


运输与保存方法
 

运输方式:室温运输。
保存方式:粉末在室温或4 ºC保存有效期2年。储存液-20 °C保存,有效期1年;4 °C保存,有效期2周。不可重新冻存。


注意事项
 

1)配置好的PEI溶液从-20 ºC拿出融化后,可放在ºC冰箱保存,绝不可重新冻存。

2)对大多数细胞来而言,每1 μg DNA 使用 3.0 μL PEI转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1 μg DNA使用1.5~4 μL体积线性PEI转染试剂进行优化。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

4)本产品仅用于科研用途,不可用于人体。


储存液配置(1 mg/mL)
 

1.材料

PEI 25000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或类似的生物级水、12 mol/L盐酸(HCl)、10 mol/L氢氧化钠(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。

2. 配置储存液(1 mg/mL)

1)于1 L玻璃烧杯,将1g PEI 25000粉末加入900 mL Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水中,在磁子搅拌器上搅拌均匀,产生小涡。

2)边搅拌边滴加入盐酸(12 mol/L)调节pH,直至pH<2.0。

3)盖上烧杯顶部并搅拌3小时至溶解;整个过程要保持pH<2.0。

【注】:可能会存在一些小纤维状颗粒不能溶解,这是正常现象。

4)边搅拌边滴加入NaOH(10 mol/L)调节pH,直至到6.9 ~7.1。

5)将溶液转入量筒内,并加水定容到1 L。

6)用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1 mg/mL的储存液。

7)根据需要分装并储存在-20 °C,1年稳定。

【注】:储存液再次融化后,可置于4 °C保存,2周稳定,但绝不可重新冻存。


转染操作流程(以6孔板为例)
 

1.接种细胞:为了提高转染效率,建议在转染前一天接种细胞,以转染时细胞密度在 70%~80%为宜

2.准备DNA-PEI复合物:按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物: 

1)对于每孔细胞,使用100 μL无血清培养基稀释2 μg目的DNA ,充分混匀 DNA稀释液

【注】:无血清稀释液建议采用 Opti-MEM或ddH2O

2)立刻向100 μL的DNA稀释液中加入5 μL的PEI 25000转染试剂,旋涡10秒,充分混匀。

3)在室温下孵育10~25 min,使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。

3.转染细胞:

1)在形成复合物过程中,移除细胞生长培养基,每孔中加入2 mL新鲜预热的培养基。

2)直接将100 μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。

3)37 ℃,5% CO2培养箱培养,转染后最快h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

4.稳转筛选(可选)

转染 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释10倍以上),37 ℃,5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养皿

表面积(cm2

DNA的量(μg)

转染试剂的量μL

稀释液体积μL

培养基总量

96孔板

0.3

0.1

0.1

10

100 μL

48孔板

0.7

0.2

0.3

20

200 μL

24孔板

1.9

0.5

1

50

500 μL

12孔板

3.8

1

2

50

1mL

6孔板

10

2

4

100

2 mL

25cm2培养瓶

21

4

8

200

4 mL

75cm2培养瓶

58

10

20

500

10 mL


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名称

货号

规格

价格(元)

Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

40802ES01*

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168.00

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HB210813


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