Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix 通用TaqMan多重荧光定量PCR预混液 | 11211ES03 | 1 mL | 1432.00 |
11211ES08 | 5*1 mL | 5732.00 | |
11211ES09 | 5 mL | 5732.00 | |
11211ES20 | 20 mL | 20635.00 | |
11211ES60 | 100*1 mL | 93235.00 | |
11211ES61 | 100 mL | 93235.00 |
产品描述
通用TaqMan多重荧光定量PCR预混液本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |||||
11211ES03 (1 mL) | 11211ES08 (5*1 mL) | 11211ES09 (5 mL) | 11211ES20 (20 mL) | 11211ES60 (100*1 mL) | 11211ES61 (100 mL) | ||
11211 | 2×Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 1 mL | 5*1 mL | 5 mL | 20 mL | 100*1 mL | 100 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
反应体系f
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
2×Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 12.5 | 1× |
Primer mix (10 μM) | X | 0.1 μM-0.5 μMa |
Probe mix (10 μM) | X | 50 nM-250 nMb |
Rox reference dyec | 0.4 | 1× |
Template DNA/cDNAd | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25e | - |
【注】使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整；
b) 探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整；
c) Rox reference dye：使用在Applied Biosystems等Real Time PCR扩增仪上，用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差；本产品不含Rox reference dye。如需，推荐使用货号10200ES产品。
d) 模板稀释：qPCR灵敏度*，建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液，则模板体积不超过总体积的1/10；
e) 反应体系：推荐使用25 μL、30 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
f) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
参考扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 15 sec | 45 |
退火/延伸a | 60℃ | 30 secb |
【注】a) 退火/延伸：温度和时间可根据设计的引物Tm值适当调整。
b) 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。几种常见仪器的时间设定如下：
20 sec：Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec：Applied Biosystems 7300
32 sec：Applied Biosystems 7500
注意事项
一、关于操作
1）请于使用前确保产品*解冻并*混匀，短暂离心收集至管底后，置于冰上备用。
2）为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3）使用过程中避免产品的反复冻融。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
二、实验方法
a) 引物设计
1. 引物必须具有特异性。
2. 引物的Tm值必须在58-60℃，而且各组引物的Tm差异应控制在1-2℃。
3. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。
b) 探针设计
1. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10℃（68-70℃）。
2. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。
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产品名称 | 货号 | 规格 |
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HB220113
