Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
Salt Active UltraNuclease GMP-grade 耐高盐全能核酸酶 | 20159ES25 | 25 KU | 5475 |
20159ES50 | 50 KU | 10135 | |
20159ES60 | 100 KU | 18275 | |
20159ES80 | 1 MU (1000 KU) | 询价 | |
20159ES90 | 5 MU (5000 KU) | 询价 |
产品描述
Salt Active UltraNuclease GMP-grade（耐高盐全能核酸酶）是一种来源于海洋微生物的重组非特异性核酸内切酶，与UltraNuclease相比在0.5M NaCl条件下具有最佳活性，广泛应用于生产工艺流程中，有效去除核酸污染。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化，不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究；还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂，将宿主残留核酸降至皮克（pg）级别从而提高生物制品功效和安全性；并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞（PBMC）的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供，储存于缓冲液（20 mM Tris-HCl，5 mM MgCl2，500 mM NaCl，50%Glycerol，pH 8.0）中，无色透明液体。
产品性质
来源 | E. coli |
分子量（Molecular Weight） | 24.7 kDa |
等电点 | 9.61 |
纯度（Purity） | ≥ 99%（SDS-PAGE） |
酶活（Enzyme Activity） | 250-300 U/μL |
pH（Optimum pH） | |
温度（Optimum Temperature） | 37℃（工作范围0-42℃） |
辅助因子（Cofactor） | 1-10 mM Mg2+ |
内毒素（Endotoxin） | < 0.25 EU/1000 U |
储存缓冲液（Storage Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH 8.0，5 mM MgCl2，500 mM NaCl，50%甘油 |
活性单位定义（Unit Definition） | 在37℃，pH 8.0反应条件下，在30 min内消化鲱鱼精DNA成为寡核苷酸，使△A260吸收值变化1.0所用的酶量定义为一个活性单位（U）。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周，建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、 样本准备
贴壁细胞：去除培养基，用PBS清洗细胞，去除上清。
悬浮细胞：离心收集细胞，用PBS清洗细胞，6,000 rpm 离心10 min，收集沉淀。
大肠杆菌：离心收集菌体，用PBS清洗1次，8,000 rpm 离心5 min，收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量（g）与体积（mL）比1：(10~20) 的比例进行裂解处理，也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞（1 g细胞约为109个）。
3、酶的添加
1. 添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内，将pH调整成8-9。
2． 按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加Salt ActiveUltraNuclease，37℃孵育30min以上。也可以自行选定添加方案，在一定范围内增加酶量，消化所需时间相应减少。
【注】耐高盐全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响，初次使用时建议摸索最适浓度。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清，再进行后续相关实验。
【注】若溶液偏酸性或者偏碱性，含有较高浓度的去垢剂、变性剂，应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
HB220414
