重组人泛素结合酶筛选试剂盒

20440ES重组人泛素结合酶筛选试剂盒

参考价: ¥5230

具体成交价以合同协议为准
2024-04-18 08:35:35
255
属性:
供货周期:两周;应用领域:医疗卫生,生物产业;
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规格:
10T;
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产品属性
供货周期
两周
应用领域
医疗卫生,生物产业
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重组人泛素结合酶筛选试剂盒

参考价: ¥5230

10T 5230元 99 件可售
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

泛素化是通过三个酶促步骤实现的。在ATP依赖的过程中,泛素激活酶(E1)催化与泛素形成活性硫酯键,然后转移到泛素载体蛋白的活性位点半(E2)。泛素级联对特定底物蛋白的选择性依赖于E2结合酶(细胞中包含的相对较少)和泛素-蛋白连接酶(E3)之间的相互作用,迄今为止已经鉴定出600多种这种酶。E3s是一个大的,多样化的蛋白质组,其特征是几个确定的基序之一。这些包括HECT(与e6相关蛋白c端同源

详细介绍

产品信息

产品名称

产品编号

规格

E2 Select Ubiquitin Conjugation Kit重组人泛素结合酶筛选试剂盒

20440ES10

10 T

 

产品简介

泛素化是通过三个酶促步骤实现的。在ATP依赖的过程中,泛素激活酶(E1)催化与泛素形成活性硫酯键,然后转移到泛素载体蛋白的活性位点半(E2)。泛素级联对特定底物蛋白的选择性依赖于E2结合酶(细胞中包含的相对较少)和泛素-蛋白连接酶(E3)之间的相互作用,迄今为止已经鉴定出600多种这种酶。E3s是一个大的,多样化的蛋白质组,其特征是几个确定的基序之一。这些包括HECT(与e6相关蛋白c端同源),RING(真正有趣的新基因)或U-box(没有Zn2+结合配体的完整补充的修饰的RING基序)结构域。而HECT E3s在泛素化过程中具有直接的催化作用,RING和U-box E3s促进蛋白质泛素化。 后两种E3类型充当适配器类分子。 它们使E2和底物足够接近,从而促进底物的泛素化。虽然许多RING-type e3,如MDM2和c-Cbl,可以单独发挥作用,但其他一些是作为更大的多蛋白复合体的组成部分,如后期促进复合体。综上所述,这些多面的特性和相互作用使E3s能够利用泛素-蛋白酶体系统,在真核生物的所有细胞中提供一种强大而具体的蛋白质清除机制。该筛选试剂盒集合了11种常用E2结合酶,可以筛选具有E3连接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.

 

产品性质

来源(Source)

E.coli

分子量(Molecular Weight)

Ubiquitin约10 kDa,E1酶大约116 kDa,E2s11种,E3酶大约102kDa,底物蛋白大约40.7kDa。

外观(Physical Appearance)

泛素蛋白冻干粉,其他是液体;

标签(Tag)

None

纯度(Purity)

> 95% by SDS-PAG

储存液(Stock)

0.88 mg/ml (25 µM) in 50 mM HEPES pH 7.5, 200 mM NaCl, 10% Glycerol.

浓度(Concentration)

见管外标签

 

产品组分

组分编号

组分名称

规格

20440-A

10 × Reaction Buffer

200 μL

20440-B

10 × E1 Enzyme (His-tag)

200 μL

20440-C

5 × Ubiquitin (冻干粉中加 400μL 水)

400 μL

20440-D

10 × Mg2+ -ATP

200 μL

20440-E

10 × E3 Ligase Itch (Positive control)

20 μL

20440-F

20 × S5a substrate (Positive control)

20 μL

20440-G

20 × UBE2R1/UbcH3/Cdc34 (2R1)

15 μL

20440-H

20 × UBE2N/UBE2V2 Complex (2N/2V2)

15 μL

20440-I

20 ×UBE2D1/UbcH5a (D1)

15 μL

20440-J

20 × UBE2D2/UbcH5b (D2)

15 μL

20440-K

20 ×UBE2D3/UbcH5c (D3)

15 μL

20440-L

20 × UBE2L3/UbcH7 (2L3)

15 μL

20440-M

20 × UBE2K/E2-25K(2K)

15 μL

20440-N

20 × UBE2C/UbcH10(2C)

15 μL

20440-O

20 × UBE2H/UbcH2(2H)

15 μL

20440-P

20 × UBE2L6/UbcH8(2L6)

15 μL

20440-Q

20 × UBE2E1/UbcH6(E1)

15 μL

反应体系配制(20 μL)

组分

体积

ddH2O

Up to 20 μL

10 × Reaction Buffer

2 μL

10 × E1 Enzyme

2 μL

5 × Ubiquitin

4 μL

10 × ATP-Mg

2 μL

20 × E2 Enzyme

1 μL

E3 Ubiquitin Ligase*

2 μL

Substrate(可选)*

1 μL

备注: *组分,使用者自己准备,E3 Ubiquitin Ligase 可重组表达或从细胞裂解液中纯化,Substrate (可选) not required for analyzing E3 Auto-Ubiquitination.

阳性对照反应体系(20 μL)

组分

体积

ddH2O

to 20 μL

10 × Reaction Buffer

2 μL

10 × E1 Enzyme

2 μL

5 × Ubiquitin

4 μL

10 × ATP-Mg

2 μL

20 × E2 Enzyme

1 μL

10 × E3 Ligase Itch (Positive control)

2 μL

20 × S5a substrate (Positive control)

1 μL

 

反应条件

37℃孵育(30min~2h,如果效果不明显可增加反应时间12h),建议使用PCR仪或金属浴.

 

结果检测

  1. 取样品20 μL加入5 μL的5×SDS-PAGE Buffer,加热样品95 ℃ 5min,随后使用还原性(含DTT)上样缓冲液进行SDS-PAGE电泳分析;

  2. 选择E3 Ubiquitin Ligase、泛素、Substrate抗体进行Western Blot分析.

 

储存条件

-25~-15℃保存

 

注意事项

1. 避免反复冻融。

2. 本产品仅作科研用途

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240227


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