Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品简介
白细胞介素 12(IL-12), 也称为自然杀伤细胞刺激因子(NKSF)或细胞毒性淋巴细胞成熟因子(CLMF), 是一种异二聚体多效性细胞因子，由 40 kDa(p40)亚基和35 kDa(p35) 亚基组成。IL-12 p40亚基由IL-23共享，IL-23是另一种异二聚体细胞因子，具有与IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬细胞和B细胞产生，已被证明对T细胞和自然杀伤（NK）细胞有多种作用。虽然小鼠IL-12在人和小鼠细胞上都有活性，但人IL-12在小鼠细胞上没有活性。
翌圣Mouse IL-12 p70 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的小鼠白介素12 p70(Mouse IL-12 p70)。特异性抗小鼠白介素12 p70抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的小鼠白介素12 p70与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠白介素12 p70的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号 | 98007ES48 / 98007ES96 |
规格 | 48 T / 96 T |
检测范围 | 31.25-2000 pg/mL |
检测方法 | 双抗夹心法 |
检测物种 | 小鼠 |
检测时长 | 4.5小时 |
灵敏度 | 7.19 pg/mL |
稀释线性 | 96 - 124% |
回收率 | 82 - 122% |
板内差 | 3.2% |
板间差 | 4.8% |
实验数据
标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
灵敏度检测
IL-12 p70的低检测限为7.19 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定10次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。
项目 | 板内精密度 | 板间精密度 | ||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
10 | 10 | 10 | 30 | 30 | 30 | |
平均值 | 960.8 | 226.7 | 51.0 | 976.8 | 228.4 | 51.4 |
标准差 | 43.6 | 5.2 | 1.5 | 56.9 | 8.2 | 2.6 |
变异系数（%） | 4.5 | 2.3 | 2.9 | 5.8 | 3.6 | 5.0 |
回收率检测
通过不同水平的IL-12 p70添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围（%） |
血清 | 104.3 | 95.2-117 |
血浆 | 91.8 | 82.3-101.6 |
细胞培养上清 | 109.6 | 98.5-122.4 |
稀释线性检测
血清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 114.5 | 109.9-122.2 |
1:04 | 104.5 | 96-112.9 |
1:08 | 112.4 | 106.9-118.8 |
1:16 | 113.8 | 103.1-121.2 |
细胞培养上清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 115.2 | 114.4-116.9 |
1:04 | 113.7 | 108.9-116.8 |
1:08 | 117.9 | 111.7-124.5 |
1:16 | 118.1 | 115-121.2 |
样本值
应用本试剂盒，检测若干正常小鼠的血清、血浆和细胞培养上清样本，数据仅供参考，结果见下表：
样本类型 | 样本数目 | 平均值（pg/mL） | 样本值（pg/mL） |
血清 | 6 | n.d. | n.d. |
血浆 | 6 | n.d. | n.d. |
细胞培养上清 | 6 | n.d. | n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL
测定特异性
本试剂盒识别天然和重组小鼠白介素12 p70。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | |
GM-CSF | IL-6 | IFN-γ |
IFN-γ | IL-10 | IL-1α |
IL-1α | IL-12 | IL-1β |
IL-1β | IL-17A | IL-4 |
IL-2 | IL-23 | IL-6 |
IL-3 | TNF-α | IL-10 |
IL-4 | IL-17A | |
IL-5 | TNF-α | |
检测简图
疑问解答
问题 | 造成原因 | 解决方法 |
标曲不好 | 移液量不准确 | 检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 | ||
显色值偏低 | 孵育时间太短 | 给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 | 校准移液器和规范操作 | |
CV偏高 | 酶标板清洗不当 | 使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 准备新鲜洗液 | |
灵敏度较低 | 试剂盒储存不当 | 按照产品组分表进行保存。 |
