Yeasen/翌圣生物 品牌
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Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台研发的用于Multi-CUT&Tag实验的文库构建试剂盒，适用于100-100,000个细胞起始量的样本建库。Multi-CUT&Tag是研究蛋白与DNA互作的技术，相较于传统的CUT&Tag，该技术使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可实现一份细胞，两种靶标的研究，同时，该技术实验中无需再添加二抗。该技术具有一抗抗体投入量更少、无需二抗、文库产量更高等优点。经过细胞捕获、一抗孵育、转座酶孵育、转座酶激活、掺入DNA标准品、细胞裂解、磁珠回收gDNA、文库扩增和磁珠分选等步骤，靶蛋白结合的DNA片段最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。
本试剂盒包含两个独立模块：BOX-I和BOX-II。BOX-I的核心为结合细胞的ConA磁珠和回收DNA的磁珠，BOX-II包含细胞透化剂、蛋白酶抑制剂、抗体结合buffer、转座酶结合buffer、蛋白酶K以及后续文库扩增所需的所有试剂。此外，本试剂盒已在不同种类细胞（如293T、K562、CHO、ESC细胞等）和动物组织（脑组织、肝脏、脾等）中进行了验证，均具有良好的建库效率和建库产量。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，上保证了文库的稳定性和重复性。
组分信息
组分编号 | 组分名称 | 12592ES04 | 12592ES12 | 12592ES48 | |
BOX-I | 12592-A | ConA Beads | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12592-B | DNA Selection Beads | 840 μL | 2.52 mL | 10.08 mL | |
12592-C | Cell wash buffer | 3.6 mL | 10.8 mL | 43.2 mL | |
12592-D | ConA bind buffer | 400 μL | 1.2 mL | 4.8 mL | |
BOX-II | 12592-E | Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free) | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12592-F | 5% Digitonin | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-G | 3 M NaCl | 120 μL | 360 μL | 1440 μL | |
12592-H | 50x Protein blocker | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-I | Anti-mouse Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-J | Anti-rabbit Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-K | 30x Activating buffer | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-L | 15x Terminate Solution | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-M | DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL) | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-N | 30x Proteinase K | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-O | 2×Ultima Amplification Mix | 100 μL | 300 μL | 1.2 mL | |
12592-P | i5 Universal Primer | 8 μL | * | * | |
12592-Q | i7 Index Primer (T701) | 8 μL | * | * | |
【注】：*12592ES12/48试剂盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417进行完整建库；
*12592ES04中，index信息为i5 index GCCTTATG（对应mouse来源抗体数据）、AGGATATG（对应rabbit来源抗体数据）、i7 index TAAGGCGA（不同测序平台，i5端对应的序列可能需要反向，具体见参考第六部分：文库结构）。
储存条件
BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。
