Yeasen/翌圣生物 品牌
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PCSK9(前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9)，也称为前蛋白转化酶9或NARC-1(神经凋亡调节转化酶1)，是枯草杆菌蛋白酶相关 内蛋白酶的蛋白酶K亚家族的成员。小鼠PCSK9 cDNA编码694个氨基酸，包括一个信号肽、一个前结构域和一个催化结构域。PCSK9在肝、肠和肾中高度表达。
PCSK9的主要生理功能是介导低密度脂蛋白受体(LDLR)的降解。在人类中，遗传分析表明，在PCSK9基因中具有无义或功能丧失突变的个体具有显著较低的血浆LDL 水平，而在小鼠中，施用PCSK9中和抗体或反义寡核苷酸降低血清 。这些研究清楚地表明，PCSK9在降低肝脏LDLR水平中起着关键作用。矛盾的是，服用降 药物如他汀类药物似乎会增加PCSK9的产生。
货号 | 98019ES48 / 98019ES96 |
规格 | 48 T / 96 T |
检测范围 | 31.25-2000 pg/mL |
检测方法 | 双抗夹心法 |
检测物种 | 小鼠 |
检测时长 | 4小时50分钟 |
灵敏度 | 1.620 pg/mL |
稀释线性 | 71.3 - 103.2% |
回收率 | 72.9 - 129.4% |
板内差 | 7.2% |
板间差 | 7.4% |
标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
浓度（pg/mL） | 显色值 | 平均值 | 校准值 | |
2000 | 2.971 | 2.754 | 2.862 | 2.817 |
1000 | 1.744 | 1.610 | 1.677 | 1.631 |
500 | 0.909 | 0.901 | 0.905 | 0.860 |
250 | 0.519 | 0.488 | 0.503 | 0.458 |
125 | 0.295 | 0.277 | 0.286 | 0.241 |
62.5 | 0.188 | 0.165 | 0.176 | 0.131 |
31.25 | 0.111 | 0.103 | 0.107 | 0.062 |
0 | 0.047 | 0.044 | 0.045 | / |
灵敏度检测
Mouse PCSK9的检测限为1.620 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测32次，评估酶标板间的精密度。
项目 | 板内精密度 | 板间精密度 | ||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 32 | 32 | 32 | |
平均值 | 784.0 | 182.4 | 39.9 | 850.1 | 199.6 | 42.8 |
标准差 | 49.4 | 13.0 | 3.3 | 57.5 | 17.6 | 2.8 |
变异系数（%） | 6.3 | 7.1 | 8.1 | 6.8 | 8.8 | 6.5 |
回收率检测
通过不同水平的Mouse PCSK9添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围（%） |
血清 | 96.2 | 72.9-114.6 |
血jiang | 101.8 | 81.8-119.4 |
细胞培养上清 | 107.2 | 86.5-129.4 |
稀释线性检测
血清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 98.0 | 95.6-104.0 |
1:04 | 93.8 | 89.1-96.1 |
1:08 | 87.7 | 84.7-92.3 |
1:16 | 78.7 | 71.3-88.1 |
血浆稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 96.5 | 90.3-103.2 |
1:04 | 91.3 | 78.1-100.6 |
1:08 | 89.7 | 80.3-102.3 |
1:16 | 75.9 | 75.0-76.4 |
细胞培养上清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 93.2 | 88.5-98.3 |
1:04 | 91.4 | 88.9-95.3 |
1:08 | 84.8 | 81.5-88.3 |
1:16 | 80.2 | 77.9-83.3 |
样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
样本类型 | 样本数目 | 平均值（ng/mL） | 样本值（ng/mL） |
血清 | 13 | 217 | 112-312 |
血浆 | 11 | 583 | 412-748 |
细胞培养上清 | 10 | n.d. | n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL
测定特异性
本试剂盒识别天然和重组小鼠PCSK9。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: |
PCSK1 | Furin |
PCSK7 | LDL R |
PCSK9 | VLDL R |
问题 | 造成原因 | 解决方法 |
标曲不好 | 移液量不准确 | 检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 | ||
显色值偏低 | 孵育时间太短 | 给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 | 校准移液器和规范操作 | |
CV偏高 | 酶标板清洗不当 | 使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 准备新鲜洗液 | |
灵敏度较低 | 试剂盒储存不当 | 按照产品组分表进行保存。 |
