Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
人血清白蛋白 (Human Serum Albumin)，简称HSA，由580个氨基酸残基单链组成，约占血液中总蛋白的60%。它主要由肝脏产生，对维持胶体渗透压极其重要，还保持了血管室和血管外组织之间的流体平衡。同时作为一种运输蛋白，携带脂肪酸、以及各种药物和激素。血清白蛋白升高常见于浓缩脱水、大量出汗。降低则见于多种疾病，比如肝炎、肾病、营养不良等。
翌圣Human Serum Albumin (HSA) ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人血清白蛋白(Human Serum Albumin)。特异性抗人血清白蛋白抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人血清白蛋白与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人血清白蛋白的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
货号 | 97048ES48 / 97048ES96 |
规格 | 48 T / 96 T |
检测范围 | 3.13-200 ng/mL |
检测方法 | 双抗夹心法 |
检测物种 | 人 |
检测时长 | 4小时 |
灵敏度 | 0.2 ng/mL |
稀释线性 | 81 - 126% |
回收率 | 85 - 118% |
板内差 | 7.9% |
板间差 | 8.3% |
标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
浓度（ng/mL） | 显色值 | 平均值 | 校准值 | |
200 | 2.189 | 2.201 | 2.195 | 2.107 |
100 | 1.306 | 1.393 | 1.350 | 1.262 |
50 | 0.776 | 0.843 | 0.810 | 0.722 |
25 | 0.429 | 0.430 | 0.430 | 0.342 |
12.5 | 0.273 | 0.257 | 0.265 | 0.177 |
6.25 | 0.183 | 0.192 | 0.187 | 0.099 |
3.13 | 0.143 | 0.152 | 0.147 | 0.059 |
0 | 0.083 | 0.092 | 0.088 | / |
灵敏度检测
人血清白蛋白的低检测限为0.2 ng/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测36次，评估酶标板间的精密度。
项目 | 板内精密度 | 板间精密度 | ||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
20 | 20 | 20 | 36 | 36 | 36 | |
平均值 | 90 | 21.3 | 2.22 | 90.8 | 22.03 | 2.3 |
标准差 | 4.6 | 2.3 | 0.2 | 6.37 | 1.8 | 0.22 |
变异系数（%） | 5.2 | 10.9 | 7.5 | 7.0 | 8.2 | 9.6 |
回收率检测
通过不同水平的人血清白蛋白添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围（%） |
血清 | 104.5 | 84.5-117.7 |
血浆 | 99.2 | 88.0-110.0 |
细胞培养上清 | 100.5 | 91.8-111.0 |
稀释线性检测
血清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 97.7 | 87.8-100.4 |
1:04 | 96.9 | 82.8-104.4 |
1:08 | 99.2 | 82.4-109.2 |
1:16 | 104.5 | 83.6-125.7 |
血浆稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 100.2 | 82.2-115.2 |
1:04 | 93.8 | 83.2-108.6 |
1:08 | 90.8 | 80.8-111.2 |
1:16 | 100.1 | 82.0-116.9 |
细胞培养上清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 103.8 | 102.3-105.9 |
1:04 | 98.0 | 93.7-100.5 |
1:08 | 99.8 | 91.8-111.0 |
1:16 | 116.0 | 89.1-124. |
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
样本类型 | 样本数目 | 平均值（mg/mL） | 样本值（mg/mL） |
血清 | 6 | 22.6 | 9.7-58.2 |
血浆 | 6 | 20.7 | 11.1-36.6 |
细胞培养上清 | 3 | n.d. | n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得3.13 ng/mL
测定特异性
本试剂盒识别天然和重组人血清白蛋白。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: | Natural proteins: |
a-Fetoprotein | Human Pre-Albumin |
Parvalbumin | Bovine Serum Albumin |
Mouse Serum Albumin |
检测简图
问题 | 造成原因 | 解决方法 |
标曲不好 | 移液量不准确 | 检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 | ||
显色值偏低 | 孵育时间太短 | 给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 | 校准移液器和规范操作 | |
CV偏高 | 酶标板清洗不当 | 使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 准备新鲜洗液 | |
灵敏度较低 | 试剂盒储存不当 | 按照产品组分表进行保存。 |
