Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
人白介素2 (Human IL-2)也被称为T细胞生长因子，是一种15-18kDa的可变糖基化α螺旋多肽，由第4号染色体上的一个基因编码。可由CD4+和CD8+T细胞、γδT细胞、B细胞、树突状细胞和嗜酸性粒细胞表达。IL-2/IL-2R信号传导是T细胞增殖和其他免疫反应基本功能所必需的。成熟的人IL-2与小鼠和大鼠IL-2分别具有56%和66%的氨基酸序列同一性。人和小鼠IL-2表现出跨物种活性。IL-2能诱导和增强细胞毒活性，可应用治疗某些疾病、特别是对；还毒感染、免疫缺陷病及自身免疫病等治疗。
翌圣Human IL-2 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的人白介素2(Human IL-2)。特异性抗人白介素2抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人白介素2与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中2的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
货号 | 97029ES48 / 97029ES96 |
规格 | 48 T / 96 T |
检测范围 | 15.63-1000 pg/mL |
检测方法 | 双抗夹心法 |
检测物种 | 人 |
检测时长 | 4.5小时 |
灵敏度 | 3.06 pg/mL |
稀释线性 | 78 - 116% |
回收率 | 77 - 89% |
板内差 | 6.3% |
板间差 | 8.7% |
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
浓度（pg/mL） | 显色值 | 平均值 | 校准值 | |
1000 | 2.454 | 2.419 | 2.436 | 2.440 |
500 | 1.547 | 1.475 | 1.511 | 1.492 |
250 | 0.790 | 0.817 | 0.803 | 0.835 |
125 | 0.453 | 0.465 | 0.459 | 0.455 |
62.5 | 0.289 | 0.268 | 0.279 | 0.258 |
31.25 | 0.165 | 0.165 | 0.165 | 0.162 |
15.63 | 0.112 | 0.120 | 0.116 | 0.116 |
0 | 0.062 | 0.063 | 0.063 | / |
灵敏度检测
IL-2的检测限为3.06 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次，评估酶标板间的精密度。
项目 | 板内精密度 | 板间精密度 | ||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
8 | 8 | 8 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 400.2 | 83.6 | 18.7 | 399.0 | 83.3 | 19.2 |
标准差 | 24.6 | 4.8 | 1.3 | 37.3 | 5.2 | 2.0 |
变异系数（%） | 6.1 | 5.7 | 7.1 | 9.3 | 6.3 | 10.5 |
回收率检测
通过不同水平的IL-2添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型 | 平均回收率(%) | 范围（%） |
细胞培养上清 | 81.5 | 76.8-89.3 |
稀释线性检测
细胞培养上清稀释比例 | 平均期望值(%) | 范围（%） |
1:02 | 102.9 | 90.4-107.8 |
1:04 | 94.5 | 79.2-107.8 |
1:08 | 95.2 | 85.7-116.0 |
1:16 | 88.4 | 77.6-104.0 |
5.测定特异性
本试剂盒识别天然和。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | |
GM-CSF | IL-10 | GM-CSF |
IL-1β | IL-12 | IL-1β |
IL-3 | IL-17 | IL-3 |
IL-4 | IL-18 | IL-4 |
IL-5 | IL-21 | IL-6 |
IL-6 | TGF-β1 | IL-10 |
IL-8 | TNF-a | TNF-a |
问题 | 造成原因 | 解决方法 |
标曲不好 | 移液量不准确 | 检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
稀释方法不恰当 | ||
显色值偏低 | 孵育时间太短 | 给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
移液量不足或稀释不当 | 校准移液器和规范操作 | |
CV偏高 | 酶标板清洗不当 | 使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 准备新鲜洗液 | |
灵敏度较低 | 试剂盒储存不当 | 按照产品组分表进行保存。 |
