人支气管细胞系；HBE-TT图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人支气管细胞系；HBE-TT图片
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 未定
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷    1g
N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖    5g
N- 乙酰 -L- 半胱氨酸    5g
N,N- 双 (2- 羟乙基 )-3- 氨基乙磺酸    5g
N,N,- 二环已基碳化二亚胺    25g
N-2- 羟乙基哌 -N’-2- 乙基磺酸    25g
N-2- 羟乙基哌 -N’-2- 乙基磺酸钠    25g
N-2- 羟乙基哌 -N’-3- 丙磺酸    10g
NAC( 抗氧化剂 )    2g
NAO     25mg
NBD-Cl    25mg
NcoI    200U5（S），15（S）-DiHETE （50 ug）5S，15S-dihydroxy-6E，8Z，10Z，13E-eicosatetraenoic acid； 5（S），15（S）-DiHETE
ω-3 Arachidonic Acid-d8 （500 ug）8Z，11Z，14Z，17Z-eicosatetraenoic-8，9，11，12，14，15，17，18-d8 acid； ω-3 AA-d8； ω-3 Arachidonic Acid-d8
Ellman’s Reagent （250 dtn）Ellman’s Reagent
Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Strip Plate （1 ea）Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Strip Plate
Latanoprost EIA Standard （1 ea）Latanoprost EIA Standard
Vilogenin （Japanese medaka） Standard （1 ea）Vilogenin （Japanese medaka） Standard
sPLA2 （human Type IIA） AChE-FAb’ Conjugate （500 dtn）Secretory Phospholipase A2 （human synovial）； sPLA2 （human Type IIA） AChE-FAb’ Conjugate
Aldehyde Site Assay Denaturing Solution （5 mL）Aldehyde Site Assay Denaturing Solution
Tris-Glycine Stock Solution （10X） （1 L）Tris-Glycine Stock Solution （10X）
2-O-methyl PAF C-16 （10 mg）1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； 2-O-methyl PAF C-16
2-Arachidonoyl Glycerol （5 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid， 2-glyceryl ester； 2-AG； 2-Arachidonoyl Glycerol
1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol （50 mg）1-O-9Z-octadecenoyl-2-O-acetyl-sn-glycerol； OAG； 1-Oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol
2-APB （1 g）2，2-diphenyl-1，3，2-oxaza-borolidine internal salt； 2-APB
G6PDH Positive Control （50 ul）G6PDH Positive Control
SPHK Assay ATP （1 ea）SPHK ATP； SPHK Assay ATP
G6P Standard （150 ug）G6P Standard
NdeI    400U
NF-κB 激活－核转运检测试剂盒    50 次
Nicotinamide(Sirt1 抑制剂 )    10g
Nile Red    25mg
NMY51 酵母感受态细胞    10×100μL
NMY51 酵母菌种    1mL
Nocodazole( 有丝分裂抑制剂 )    5mg