人胚肾二倍体细胞；HEK-2图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人胚肾二倍体细胞；HEK-2图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来自一女性胎儿的正常肾组织。中国科学院昆明细胞库于1986年建立。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   10%FBS
传代方法  1:2传代；3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

OPD 干粉    25g
Origami B 菌种    1mL
Origami B(DE3) 菌种    1mL
Origami B(DE3)plysS 感受态细胞     0.1mL×10
Origami(DE3) 感受态细胞    0.1mL×10
Origami(DE3) 菌种    1mL
Origami(DE3)plysS 菌种    1mL
OrigamiB(DE3) 感受态细胞    10×100μL
Orth 固定液    250 mL
P- 硝基苯基磷酸胆碱    100mg
p19miRNA 检测试剂盒     50 次
p19siRNA 结合蛋白     1000U
Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉 )    100μL
PAGE 胶长加样枪头    1盒
PBS 缓冲液 ,10×    250mL
PCNA 小鼠单抗    100 μLCiticoline （sodium salt） （100 mg）P’-[2-（trimethylammonio）ethyl] ester-cytidine 5’-（trihydrogen diphosphate）-inner， monosodium salt； Cytidine 5’-diphosphocholine|Flussorex|Gerolin|Logan|Neurotron|Sinkron； Citicoline （sodium salt）
D-Luciferin （sodium salt） （50 mg）4，5-dihydro-2-（6-hydroxy-2-benzothiazolyl）-4S-thiazolecarboxylic acid， monosodium salt； D-Luciferin （sodium salt）
CAY10677 （10 mg）5-（2-amino-5-pyrimidinyl）-N，N-diethyl-1-octyl-1H-indole-3-methanamine； Icmt Inhibitor 15； CAY10677
R-848 （50 mg）4-amino-2-（ethoxymethyl）-α，α-dimethyl-1H-imidazo[4，5-c]quinoline-1-ethanol； Resiquimod|S 28463； R-848
Aprepitant （10 mg）5-[[（2R，3S）-2-[（1R）-1-[3，5-bis（trifluoromethyl）phenyl]ethoxy]-3-（4-fluorophenyl）-4-morpholinyl]methyl]-1，2-dihydro-3H-1，2，4-triazol-3-one； Emend|L-754，030|MK 869|ONO-7436； Aprepitant
MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC （1 mg）N-（4-methoxy-1，4-dioxobutyl）-L-alanyl-L-alanyl-L-prolyl-N-（4-methyl-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl）-L-valinamide； I 1270|MeOSuc-AAPV-AMC|Methoxy Succinyl-Ala-Ala-Pro-Val-AMC； MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC
Furin Inhibitor I （500 ug）N2-（1-oxodecyl）-L-arginyl-L-valyl-N-[（1S）-4-[（aminoiminomethyl）amino]-1-（2-chloroacetyl）butyl]-L-lysinamide； Decanoyl-Arg-Val-Lys-Arg-CMK； Furin Inhibitor I
β-Lapachone （25 mg）3，4-dihydro-2，2-dimethyl-2H-naphtho[1，2-b]pyran-5，6-dione； NSC 26326|SL 11001|ARQ 501|NSC 629749； β-Lapachone
PCNA 小鼠单抗    1000 μL
PCR Mix 染料    10mL
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒    5次
PCR 法 DNA 探针地高标记试剂盒    5次