人胚肺二倍体细胞;KMB-17说明书
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人胚肺二倍体细胞;KMB-17说明书

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2017-01-05 09:13:59
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

人胚肺二倍体细胞;KMB-17说明书采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

详细介绍

人胚肺二倍体细胞;KMB-17说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书

产品名称人胚肺二倍体细胞;KMB-17说明书
用途仅用科研
保存条件4℃保存一年;-20℃长期保存

细胞名称
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来自于一个4周龄女性胚胎的正常肺组织,于1975年在中国医学科学院昆明医学生物学研究所建立;可作为转染宿主,用于肺损伤或分化的研究。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)   15%NBS
传代方法  1:2传代;3-4天一次
传代情况 PN6
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。PCR 法 DNA 探针生物素标记试剂盒     5次
PCR 污染清除剂    500mL
PCR 抑制物清除剂    1mL
PCR 优化试剂盒    1套
PCR LIC 克隆套装    1μg
PD 98059(MAPKK 抑制剂 )    2mg
PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )    1g
Percoll    100mL
PFG 固定液    250 mL
Pfu DNA 聚合酶    100U
Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活剂 )     1mg
Phusion DNA 聚合酶    250U
Pifithrin-a(p53 抑制剂 )    5mg
PLP 固定液    250 mL
PLPD 固定液    250 mL
PMA/TPA (PKC 激活剂 )    1mg
PMSF 溶液,10mg/mL    5mL
pNPP 干粉    1g
Poly r(A)    100mgADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)N-(1-amino-3,3-dimethyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(4-hydroxypentyl)-1H-indazole-3-carboxamide; ADB-PINACA N-(4-hydroxypentyl) metabolite
1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE (250 mg)1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylethanolamine; 1,2-DSPE|1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphoethanolamine; 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-PE
Zanamivir (5 mg)5-(acetylamino)-4-[(aminoiminomethyl)amino]-2,6-anhydro-3,4,5-trideoxy-D-glycero-D-galacto-non-2-enonic acid; GG 167|GR 121167X|Relenza; Zanamivir
ML-180 (5 mg)6-[4-(3-chlorophenyl)-1-piperazinyl]-3-cyclohexyl-2,4(1H,3H)-pyrimidinedione; CID-3238389; ML-180
Ketoconazole (5 g)1-[4-[4-[[(2R,4S)-2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1H-imidazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]-ethanone; Nizoral|R 4140Ketoconazole
Prostaglandin B2-d4 (1 mg)9-oxo-15S-hydroxy-prosta-5Z,8(12),13E-trien-1-oic-3,3,4,4-d4 acid; PGB2-d4; Prostaglandin B2-d4
NADH Standard (1。5 mg)NADH Standard
CP 47,497-C6-homolog (5 mg)cis-5-(1,1-dimethylhexyl)-2-(3-hydroxycyclohexyl)-phenol; CP 47,497-C6-homolog
α-Linolenoyl Ethanolamide-d4 (100 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,1’,2,2’-d4)-octadeca-9Z,12Z,15Z-trienamide; α-Linolenoyl Ethanolamide-d4
Streptavidin:SureLight P3 (1 ea)Streptavidin:SureLight P3
cis-4,10,13,16-Docosatetraenoic Acid (5 mg)4Z,10Z,13Z,16Z-docosatetraenoic acid
I-BET151 (50 mg)GSK 1210151A; 7,3,5-dimethyl-4-isoxazolyl-1,3-dihydro-8-methoxy-1-[1R-1-(2-pyridinyl)ethyl]-2H-imidazo[4,5-c]quinolin-2-one
Poly(A) 聚合酶    20U
Poly(I).Poly(C)    250mg
Poly(U) 聚合酶    60U
PreScissiom 蛋白酶    100U

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