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人胚肺二倍体细胞;HEL-1*操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
人胚肺二倍体细胞;HEL-1*现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来自一男性胎儿的正常肺组织,1986年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
凝血酶 1000U
牛胆粉 100g
牛胆酸钠 25g
牛磺酸 5g
牛磺酸脱氧胆酸钠 1g
牛甲状腺素蛋白 10mg
牛肉蛋白胨 500g
牛血红蛋白 5g
牛血清 γ 球蛋白标准品,2mg/mL 1mL
牛血清白蛋白 5g
牛血清白蛋白标准品,2mg/mL 1mL
牛血清白蛋白封堵液 250mL3-Bromomethcathinone (hydrochloride) (5 mg)1-(3-bromophenyl)-2-(methylamino)-1-propanone, monohydrochloride; 3-BMC; 3-Bromomethcathinone (hydrochloride)
5-MAPDB (hydrochloride) (5 mg)1-(2,3-dihydrobenzofuran-5-yl)-N-methylpropan-2-amine, monohydrochloride; 5-MAPDB (hydrochloride)
Naringenin (10 g)2S,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; S-Dihydrogenistein|NSC 11855|NSC 34875|Salipurol; Naringenin
Magnolol (5 mg)5,5’-di-2-propen-1-yl-[1,1’-biphenyl]-2,2’-diol; NSC 293099; Magnolol
ADB-FUBINACA (1 mg)N-[1-(aminocarbonyl)-2,2-dimethylpropyl]-1-[(4-fluorophenyl)methyl]-1H-indazole-3-carboxamide; ADB-FUBINACA
JWH 081 N-pentanoic acid metabolite (10 mg)5-(3-(4-methoxy-1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl)pentanoic acid; JWH 081 N-pentanoic acid metabolite
SIRT1/2 Inhibitor IV (10 mg)2,3-dihydro-5-[(2-hydroxy-1-naphthalenyl)methyl]-6-phenyl-2-thioxo-4(1H)-pyrimidinone; Cambinol|NSC 112546|SIRT1 Inhibitor II|SIRT2 Inhibitor VI; SIRT1/2 Inhibitor IV
Pseurotin A (5 mg)(5S)-8S-benzoyl-2-[1S,2S-dihydroxy-3Z-hexen-1-yl]-9R-hydroxy-8-methoxy-3-methyl-1-oxa-7-azaspiro[4。4]non-2-ene-4,6-dione; NSC 348694; Pseurotin A
Adenosine 5’-triphosphate (sodium salt) (25 g)adenosine 5’-(tetrahydrogen triphosphate), disodium salt; ATP|NSC 20268; Adenosine 5’-triphosphate (sodium salt)
L-AP4 (10 mg)2S-amino-4-phosphono-butanoic acid; L-(+)-2-amino-4-phosphorobutanoic acid|L-APB; L-AP4
Ro 25-6981 Maleate (10 mg)αR-(4-hydroxyphenyl)-βS-methyl-4-(phenylmethyl)-2Z-butenedioate-1-piperidinepropanol; Ro 25-6981 Maleate
牛胰岛素 25mg
Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 ) 10μg
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL 5μg
Oligo 快速复性液,10× 1mL
Oligo(dT) 纤维素 25mg
Oligo(dT) 再生溶液 100mL
OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞 0.1 mL×10
ONPG 干粉 1g
ONPG 溶液,10mg/mL 10mL