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叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性叙利亚仓鼠的皮肤组织。2002年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
1,2-Bis[Bis[3,5-Bis(Trimethylsilyl)Phenyl]Phosphino]Benzene 分子式: 分子量: 英文名称: 1,2-Bis[Bis[3,5-Bis (Trimethylsilyl) Phenyl]Phosphino]Benzene CAS号: 1203710-21-7
2-氯-4-硝基苯-a-L-岩藻糖苷 分子式: 319.7 分子量: C12H14ClNO7 英文名称: 2- -4- -a-L- fucoside nitrobenzene chloride CAS号: 157843-41-9
L-丙氨酸叔丁酯盐酸盐 分子式: 181.66 分子量: C7H15NO2·HCl 英文名称: L- alanine tert butyl ester hydrochloride CAS号: 13404-22-3
钙羧酸指示剂 分子式: 438.41 分子量: C21H14N2NaO7S 英文名称: Calcium carboxylic acid indicator CAS号: 3737-95-9
苏丹II 分子式: 276.33 分子量: C18H16N2O 英文名称: Sultan II CAS号: 3118-97-6
酸性红14 分子式: 502.43 分子量: C20H12N2Na2O7S2 英文名称: Acid red 14 CAS号: 3567-69-9
溴酚红 分子式: 512.17 分子量: C19H12Br2O5S 英文名称: Dibromophenol CAS号: 2800-80-8
乙酸丙烯酯 分子式: 分子量: 英文名称: Acetic acid acrylic ester CAS号:
丙稀酰胺 分子式: 分子量: CH2=CHCONH2 英文名称: Expeviment CAS号:
N-(2-乙酰胺基)-2-亚氨基二乙酸(ADA) 分子式: 190.15 分子量: C6H10N2O5 英文名称: N- (2-) -2- two acetic acid (ADA) CAS号: 26239-55-4 陶瓷研钵 ( 直径 75 mm) 120658B-1 1个
25g 葡聚糖凝胶 G-10
20 次 包涵体微量纯化试剂盒
2g Tocopherol( 抗氧化剂 )
5000U S1 核酸酶
U0126(MEK1/2 抑制剂 ) 23-0810-1 1mg
Southern 细 (G-)DNAout 130950-10 10 次
100mL RNase-free 异硫氰酸胍溶液 ,5M
25 T 超微量 ATP 酶测试盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)
3g DNA UV 防护剂
25 次 血液线粒体和核 DNA 双提试剂盒
超微量 ATP 酶测试盒 ( 可测总 ATPase) 18-0180-25 25 T
DNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30) 101215-100 100g
0.1mL×10 SURE 化学感受态细胞
50 次 DNA 电泳分子量标准 (3)pUC19/MspI
50 次 柱式凝固血液 DNAout
1mL Stb14 种
Red-Pfu DNA 聚合酶 130837-100 100U
一管式 DNA 胶回收试剂盒 60706-30 30 次
5g 酸性品红
5次 大提柱式质粒 DNAout
250mL 氨基染膜液