中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  1957年，Puck TT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞，CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要脯氨酸。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
传代方法  1：3传代；3-4天一次
传代情况 PN3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶 
染色体  20-26
使用权限 A类

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

100mg    碱性磷酸酶标记亲和素    
100g    柠檬酸，二水    
1000μL    山羊抗兔 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记    
肌球蛋白    CAS100684-32-0    100mg
小鼠抗 c-Myc 标签单抗    130575-100    100μL
250mg    直链淀粉    
10g    L- 苯丙氨酸    
250g    麦芽浸粉    
10×100μL    T1 感受态细胞    
丙烯葡聚糖凝胶 S-100 HR    CAS65546-95-4    150mL
亚氨二介质    131059-10    10mL
50 次    柱式血清血浆 RNAout    
25g    硫柳汞    
100g    琼脂糖    
1000 支    1000 μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装带芯 )    
兔肌动蛋白    CAS51005-14-2    1mg
组蛋白 3.1 小鼠单抗    130571-1000    1000μL
非冻型血液 RNA 保存液    111202-100    100mL
1 g    糜蛋白酶原    
5g    3- 苯甲酰丙酸    
5mL    滑膜细胞生长因子    
100mg    5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚磷酸 (BCIP)    
人基因组 DNA 混合液    131034-100    100μg
分子杂交炉    120930-1    1台
 直接红81    分子式：    675.6    分子量：     C29H19N5Na2O8S2    英文名称：    Direct red 81    CAS号：    2610/11/9    
 日落黄    分子式：    452.37    分子量：     C16H10N2Na2O7S2    英文名称：    Sunset yellow    CAS号：    2783-94-0    
 酸性嫩黄G    分子式：    380.35    分子量：     C16H13N4NaO4S    英文名称：    Acid yellow G    CAS号：    6359-82-6    
 (3-BroMophenyl)(2,4,6-triMethylphenyl)iodoniuM triflate    分子式：    551.2    分子量：     C16H15BrF3IO3S    英文名称：    (3-BroMophenyl) (2,4,6-triMethylphenyl) triflate iodoniuM    CAS号：    1203709-76-5    
 4-(3-三氟甲基)哌啶盐酸盐    分子式：    265.7    分子量：     C12H15ClF3N    英文名称：    4- (3- three trifluoromethyl phenyl) piperidine hydrochloride    CAS号：    6652-16-0    
 L-缬氨酸叔丁酯盐酸盐    分子式：    173.25    分子量：     C9H19NO2    英文名称：    L- l-norvaline tert butyl ester hydrochloride    CAS号：    13211-31-9    
 溴百里香酚兰    分子式：    624.38    分子量：     C27H28Br2O5S    英文名称：    Bromothymol blue    CAS号：    76-59-5    
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆)；CHO-K1说明书苏丹Ⅳ    分子式：    380.44    分子量：     C24H20N4O    英文名称：    Su Dan    CAS号：    85-83-6    
 酸性紫7    分子式：    566.47    分子量：     C20H16N4Na2O9S2    英文名称：    Acid violet 7    CAS号：    4321-69-1    
 氯酚红    分子式：    423.27    分子量：     C19H12Cl2O5S    英文名称：    Chlorophenol red    CAS号：    4430-20-0