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叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系是于1961年由Macpherson IA、Stoker MGP建系,源自5只未辨性别的1天龄仓鼠肾;可作为转化宿主;OIE组织将该细胞用于狂犬病的诊断。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
传代方法 1:3传代;3-4天一次
传代情况 PN4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体 42-44
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
高车前素 分子式: 300.26288 分子量: C16H12O6 英文名称: High car CAS号: 1447-88-7
二氢辣椒素 分子式: 307.43 分子量: C18H29NO3 英文名称: Two hydrogen capsaicin CAS号: 19408-84-5
贝萼皂苷元 分子式: 488.7 分子量: C30H48O5 英文名称: Shell sepal saponin CAS号: 6989-24-8
溶剂橙2 分子式: 262.31 分子量: C17H14N2O 英文名称: Solvent Orange 2 CAS号: 2646-17-5
间甲基红 分子式: 269.3 分子量: C15H15N3O2 英文名称: Methyl red CAS号: 20691-84-3
酸性黄17 分子式: 551.29 分子量: C16H10Cl2N4Na2O7 英文名称: Acid yellow 17 CAS号: 6359-98-4
BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSU 分子式: 630.17 分子量: C18H20I2N2O7 英文名称: BOC-3,5-DIIODO-TYR-OSU CAS号: 163679-35-4
2,3,5,6-四氟苯酚钾盐 分子式: 204.16 分子量: C6HF4KO 英文名称: 2,3,5,6- PTFE phenol potassium salt CAS号: 42289-34-9
101白色担体 分子式: 分子量: 英文名称: 101 white bear CAS号:
考马斯亮蓝R250 分子式: 825.97 分子量: C45H44N3NaO7S2 英文名称: Kaumas blue R250 CAS号: 6104-59-2
曙红Y(水溶) 分子式: 691.85 分子量: C20H6Br4Na2O5 英文名称: Eosin Y (Shui Rong) CAS号: 17372-87-1 5μg lambda(λ)DNA
100U PreScissiom 蛋白酶
二硫赤藓醇 CAS6892-68-8 1g
细总蛋白质微量提取试剂盒 90902-30 30 次
250 mL Zenker 固定液
100μg 链激酶
96 支 10 μL RNase-free 白吸头 ( 盒装已灭长尖 )
25mg TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 喹啉
0.5mL dGTP 溶液,100mM
乙酰胆碱转移酶测试盒 18-0650-20 20 T
核酸印迹膜染液 70104-100 100mL
5次 TdT 加尾法 DNA 地高标记试剂盒
10mL 电泳橙黄 G 溶液
50 次 柱式尿液 DNAout
50 次 即用型多重 PCR 试剂盒
荧光素标记的生物素 131093-5 5mg
即用型荧光定量 PCR 试剂盒 90408-600 600 次
10 次 非变性法蛋白沉淀试剂盒
25mg 刀豆蛋白 A IV
30μg φX174RF Ⅰ DNA
L- 阿拉伯糖 CAS5328-37-0 10g
克必隆零背景 T 载体 131233-20 20 次