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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:组织无机磷可见分光光度法测试盒
规格 : 50管/48样
测试方法: 可见分光光度法
货号:GOY-01S6796
分类:离子系列
商品介绍:
无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等,此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。
测定原理:
钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。
自备仪器和用品:
离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
电泳级丙溶液 ( 干粉型 )200mL 冷冻型血液 RNA 保存液100mL
电泳级甲叉双丙 25g 酪蛋白50g
电泳级 TEMED1.5mL 昆虫种属鉴定 PCR Mix100 次
电泳级过0.1gx10 昆虫细胞裂解液50mL
电泳级尿素100g 口腔角质细胞生长因子5mL
抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL1mL OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞0.1 mL×10
APMSF 溶液,10mg/mL1mL Oligo(dT) 再生溶液100mL
抑制剂,10mg/mL10mL Oligo(dT) 纤维素25mg
抑氨肽酶,5mg/mL5mL Oligo 快速复性液,10×1mL
钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液,10mg/mL10mL Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg
超氧阴离子测试盒
超氧阴离子清除能力测试盒
橙黄决明素含量试剂盒
赤霉素(GA3)含量试剂盒
醇脱氢酶(ADH)测试盒
组织无机磷可见分光光度法测试盒Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )10L JM110 感受态细胞10×100μL
Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )50L JM109 化学感受态细胞0.1mL×10
Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )10L JC-11mg
Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )50L JC-105mg
一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 高 pH)30 次 IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。