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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:羧酸酯酶(CarE)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6543
分类:酯酶系列
商品介绍:
哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。
测定原理:
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
凝血因子12轻链抗体 卵巢癌免疫反应抗原抗体
叉头蛋白D1抗体 卵巢癌抗原抗体
岩藻糖转移酶11抗体 卵巢、胎盘、前列腺、蛋白22抗体
干扰素诱导蛋白15抗体 卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体
RNA结合蛋白9抗体 颅面部发育蛋白1抗体
昆虫总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T
昆虫总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T
昆虫组蛋白提取试剂盒100T
昆虫组蛋白提取试剂盒50T
辣根过氧化物酶 EC1.11.1.7 100 mg/瓶
羧酸酯酶(CarE)微量法测试盒肺炎克雷伯菌CMCC46117冻干粉南京便诊 酿酒酵母
苏云金芽孢杆菌猝倒亚种 紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)
玖红穗状霉 解淀粉芽孢杆菌
营养琼脂(NAP)[肉汤琼脂平板][空气平皿]90mm 金黄色葡萄球菌ATCC6538冻干粉
菲律宾链霉菌 木素木霉
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。