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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:乙醇微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6340
分类:辅酶Ⅰ系列
商品介绍:
酒是含酒精(乙醇)饮料的统称,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒质量的重要指标之一。我国是早发明酿酒的国家,也是酒类产品消费大国,其消费量居世界。因此,快速、准确测定酒中乙醇含量,对于确保酒的质量和保护消费者的健康具有重大意义。
测定原理:
乙醇在乙醇脱氢酶的催化下氧化脱氢生成乙醛,同时,NAD被还原生成NADH,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色,通过450 nm下测定吸光值变化可测得乙醇含量。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
腺苷酸环化酶6抗体 转化生长因子β1结合蛋白1抗体
腺苷酸环化酶9抗体 转化生长因子β1/TGF β1/TGF-β1抗体
三0酸腺柠檬酸裂解酶抗体 转化生长因子β(TGFβ)抗体
蛋白激酶A2抗体 转化神经突起蛋白抗体
血管动蛋白抗体 转化蛋白p21抗体(原癌基因H-ras抗体)
大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa检测试剂盒免费代测
大鼠超敏热休克蛋白70(HSP-70)elisa分析检测试剂盒
大鼠超敏热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)elisa检测试剂盒
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乙醇微量法测试盒柱式细菌 DNAout( 含 )50 次 新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
大提柱式细菌 DNAout4次 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)5g
大提柱式细菌 DNAout( 含 )4次 辛甲基 β 葡糖苷1g
百万碱基级细菌 (G-)DNAout10 次 心肌细胞生长因子5mL
百万碱基级细菌 (G+)DNAout10 次 小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。