【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
产品名称：脂肪酸合成酶（FAS）微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号：GOY-01S6366
分类：辅酶Ⅱ系列
商品介绍：
细胞内脂质的积累是脂质合成与分解失衡的结果。脂肪酸合成增多，而氧化分解降低，会导致细胞内脂质积累。FAS是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰和丙二酰而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。

测定原理

以NADPH为还原力，FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成长链脂肪酸；通过测定NADPH的减少量，即可推算出FAS活性。

实验中所需仪器和用品

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。
试剂的组成和配制
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体18μL×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1瓶， 4℃保存；
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表：

图

样本的前处理
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )40μL  dCTP 溶液，2.5mM2mL

Zinquin 乙酯5mg  dCTP 溶液，100mM0.5mL

1400W(iNOS 抑制剂 )2mg  DB3.1 感受态细胞10×100μL

5-Fluorouracil(5- 氟脲嘧啶 )1mL  dATP 溶液，2.5mM2mL

Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)20μL  dATP 溶液，100mM0.5mL

Cycloheximide50mg  CFDA SE ( 细胞增殖示踪荧光探针 )5mg

Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg  cDNA 第一链合成试剂盒50 次

Decitabine 地西他滨5mg  cDNA 第一链合成试剂盒10 次

Doxorubicin(Adriamycin) 100μL  cDNA 第二链合成试剂盒30 次

Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL  Catechin hydrate( 抗氧化剂 )0.5g
大鼠γ-半合成酶(γ-GCS)elisa检测试剂盒

大鼠δ氨基乙酰丙酸脱水酶(ALAD)elisa分析检测试剂盒

大鼠δ氨基乙酰丙酸脱水酶(ALAD)elisa检测试剂盒

大鼠δ样蛋白4(δLL4)elisa检测试剂盒

大鼠阿黑皮素原(POMC)elisa分析检测试剂盒
脂肪酸合成酶（FAS）微量法测试盒植物种属鉴定 PCR Mix 8100 次  大提柱式血液 DNAout4次

植物种属鉴定 PCR Mix 9100 次  大提柱式细菌 RNAout5次

植物种属鉴定 PCR Mix 10100 次  大提柱式细菌 DNAout4次

植物种属鉴定 PCR Mix 11100 次  大提柱式细菌 DNAout( 含 )4次

转 ESPES 基因植物 PCR Mix100 次  大提柱式土壤 DNAout4次
FBP活性计算：
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。