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产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)微量法测试盒 | 100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6370 |
商品介绍:
TrxR是一种NADPH依赖的包含FAD结构域的二聚体硒酶,属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员,与硫氧还蛋白以及NADPH共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR与GR活性类似,催化GSSG还原生成GSH,是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。
测定原理:
TrxR催化NADPH还原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通过测定412nm波长处TNB的增加速率,即可计算TrxR活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。
测定操作表:
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
MQAE( 氯离子荧光探针 )20mg Di-2-ANEPEQ 5mg
NAO 25mg DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10
NBD-Cl25mg DH10B 感受态细胞0.1 mL×10
Nile Red25mg dGTP 溶液,2.5mM2mL
Quin-2AM1mg dGTP 溶液,100mM0.5mL
dATP 溶液,100mM0.5mL 高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次
dTTP 溶液,2.5mM2mL 高 GC DNA 清除剂,PCR 级1.5mL
dTTP 溶液,100mM0.5mL 溶液 ,100mg/mL1mL
dGTP 溶液,2.5mM2mL 肝细胞生长因子5mL
dGTP 溶液,100mM0.5mL 钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液,10mg/mL10mL
大鼠γ分泌酶elisa检测试剂盒
大鼠γ干扰素(IFN-γ)elisa分析检测试剂盒
大鼠γ干扰素(IFNγ)elisa检测试剂盒
大鼠γ干扰素(IFN-γ)elisa检测试剂盒
大鼠γ-干扰素(IFNγ)elisa检测试剂盒
硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)微量法测试盒脂蛋白 PAGE 染液1套 Glucosamine( 胰岛素抵抗诱导剂 )5g
糖蛋白 PAGE 染液1套 Genistein( 蛋白激酶抑制剂 )25mg
质谱兼容型蛋白银染试剂盒10 次 G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD
银染清除剂30 次 G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD
成骨细胞生长因子5mL Fura-2,五铵盐1mg