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产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)微量法测试盒 | 100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6344 |
商品介绍:
MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
测定原理:
MDHAR 催化 NADH 还原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。
实验中所需仪器及设备:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和双蒸水
测定操作表:
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
Nutlin-3(MDM2 拮抗剂 )1mg Actin-Tracker Green( 微丝绿色荧光探针 )0.2mL
Okadaic acid 钾盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )10μg Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg
Paclitaxel(TAXOL)( )100μL Acridine Orange(AO)100mg
PD 98059(MAPKK 抑制剂 )2mg Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
PDTC(NF-κB 抑制剂 / 抗氧化剂 )1g Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL
Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)20μL Dansyl chloride 100mg
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL DAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次
Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )1mg DAB 法杂交试剂盒5次
AG490(JAK 抑制剂 )5mg Cyclosporin A( 免疫抑制剂 /PP2B 抑制剂 )50mg
AICAR(AMPK 激活剂 )5mg Cycloheximide50mg
大鼠白介素15(IL15)elisa检测试剂盒
大鼠白介素15(IL-15)elisa检测试剂盒
大鼠白介素16(IL-16)elisa分析检测试剂盒
大鼠白介素16(IL16)elisa检测试剂盒
大鼠白介素16(IL-16)elisa检测试剂盒
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)微量法测试盒柱式土壤 RNAout50 次 柱式微生物基因组 DNAout 50 次
真菌 RNAout50 次 柱式土壤 RNAout50 次
真菌 RNAout250 次 柱式土壤 DNAout50 次
柱式真菌 RNAout50 次 柱式探针纯化试剂盒10 次
柱式真菌 RNA-DNA 双提试剂盒50 次 柱式水样 DNAout50 次