【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒品牌

规格 : 50管/48样、100管/96样

测试方法:微量法、可见分光光度法

货号：YS-01S6449

测定意义

PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。

测定原理

PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原WST-8产生黄色物质，从而导致450nm光吸收的增加。

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纤维母细胞生长因子4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

脑钠素/利钠肽抗体 Anti-BNP 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser332) 磷酸化转录因子E2F-1抗体 规格 0.1ml

纤维素膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Whatman

ZNF281 英文名称： 锌指蛋白281抗体 0.2ml

DEF6/IBP 英文名称： 干扰素调节因子4结合蛋白抗体 0.2ml

脑钠素/利钠肽抗体 Anti-BNP 0.1ml

Ezrin/Radixin 埃兹蛋白(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

丁酰胆碱脂酶抗体(N端) Anti-BCHENT 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1142) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

马血清 100ml Gibco

ZNF772 英文名称： 锌指蛋白772抗体 0.2ml

DOK1 英文名称： D酪酸激酶衰减蛋白1抗体 0.1ml

丁酰胆碱脂酶抗体(N端) Anti-BCHENT 0.1ml

ZBTB12 英文名称： 锌指蛋白ZBTB12抗体 0.2ml

phospho-Dishevelled 2 (Thr224) 英文名称： 磷酸化蓬乱蛋白2抗体 0.1ml

水通道蛋白-1抗体 Anti-AQP1 0.1ml

Anti-CEA/HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人癌胚抗原单克隆抗体(包被)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-ELk1(Thr417) 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体 规格 0.1ml

E2F4 转录因子E2F-4抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒品牌硫酸铝十二水(>99%,BR)洛伐他汀高分子蛋白标准样

铝粉(>99%,BR)芒柄花黄素等电聚焦蛋白电泳（IEF）2倍上样缓冲液

丁卡那霉素无水拟人参皂苷F11等电聚焦蛋白电泳（IEF）10倍阳电泳缓冲液

氨茶碱(>98%,BR)人参皂苷Rb1等电聚焦蛋白电泳（IEF）10倍阴电泳缓冲液

酸铵三水(>99%,BR)人参皂苷Rb2等电聚焦蛋白电泳（IEF）10倍染色溶液

柠檬酸铋铵人参皂苷Rb3等电聚焦蛋白电泳（IEF）10倍祛色溶液

硫酸氢铵(>98%,BR)人参皂苷Rg1等电聚焦蛋白电泳（IEF）标准补水缓冲液

溴化铵(>99%,BR)人参皂苷Rg2等电聚焦蛋白电泳（IEF）强化补水缓冲液
操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。