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上海市所在地
产品名称:顺乌头酸酶(ACO)活性检测试剂盒品牌
规格 : 50管/48样、100管/96样
测试方法:微量法、紫外分光光度法
货号:YS-01S6457
测定意义
顺乌头酸酶(aconitase),三羧酸循环中的酶,催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化,在顺乌头酸酶作用下,通过脱水与加水反应,使羟基由β碳原子转移到α碳原子上,生成易于脱氢氧化的异柠檬酸,为进一步的氧化脱羧反应作准备。
测定原理
ACO催化柠檬酸转化成异柠檬酸,异柠檬酸氧化脱羧将NAD+ 还原生成NADH,导致340nm处光吸收上升。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 。
4 ). 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
Anti-HSP-70/HRP 辣根过氧化物酶标记热休克蛋白70抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
human IgM (亲和纯化)人IgMMulti-class antibodies规格: 1mg
抗组蛋白抗体 Anti-Histone H3 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG 兔抗马IgG 1mg
FAM78B 英文名称: FAM78B蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RKIP (Ser 153) 磷酸化Raf激酶抑制蛋白抗体 规格 0.1ml
human IgM (亲和纯化)人IgMMulti-class antibodies规格: 1mg
TP53(tumor protein p53; Li-Fraumeni syndrome) 抗P53抗原Multi-class antibodies规格: 0.5ml
Anti-Caldesmon 钙介质素抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDHB 丙酮酸脱氢酶E1β亚单位抗体 规格 0.2ml
Bcl-2 浓缩液 0.1ml 进口分装
TrkA 英文名称: 酪酸激酶A抗体 0.1ml
Phospho-CEBP alpha (Thr222 + Thr226) 英文名称: 磷酸化转录调节因子CEBP α 抗体 0.1ml
Anti-Caldesmon 钙介质素抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SOCS1 英文名称: 细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体 0.1ml
Epac1 英文名称: 环磷酸腺苷调节鸟嘌呤核苷酸交换因子1抗体 0.2ml
孤菲肽/痛敏肽抗体 Anti-Nociceptin 0.1ml
Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) /FITC 荧光素标记磷酸化受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53结合蛋白1抗体 规格 0.1ml
ABCG1 peptide 三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
顺乌头酸酶(ACO)活性检测试剂盒品牌加拿大香脂续随二萜动物糖蛋白酶解法*糖基分解试剂盒
正己酸(>98%,BR)千金子二萜动物糖蛋白化学法*糖基分解试剂盒
己内酰(>98%,BR)龙脑动物糖蛋白酶解法非N非O糖基磷脂酰肌(GPI)分解试剂盒
羧肽酶 Y >50 U /mg5-羟甲基糠动物糖蛋白电泳迁移检测试剂盒
蓖麻油β-胡萝卜素动物糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒
1,1-环己基二乙酸百秋李动物组织石蜡切片糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒
反式-1,2-环己二乙酸(>98%,BR)去氢木香内酯动物组织冻切片糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒
乙酸纤维素木香烃内酯动物全组织糖蛋白高酸希尔(PAS)法阿尔新蓝(ALCIAN BLUE)染色试剂盒