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产品名称:丙酮酸(PA)含量测试盒说明书
规格 : 50管/48样、100管/96样
测试方法:微量法、可见分光光度法
货号:YS-01S6455
测定意义
丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。
测定原理:
丙酮酸与2,4-二硝基肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基腙,在碱性溶液中呈樱红色。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 。
4 ). 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
Anti-NEP/FITC 荧光素标记脑啡肽酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体 Anti-ANGPTL1/ANG-1 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Cy3 Cy3标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNT1 英文名称: 多肽N-乙酰基半乳糖转移酶1抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh procollagen type IIA Ⅱ型胶原α1抗体 规格 0.2ml
Mouse Anti-human VEGF/FITC 荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
PIWIL1(piwi-like 1) piwi 样1蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CD68 CD68抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh p150 CAF1 染色质组装因子1P155抗体 规格 0.2ml
SCGN Kit Human 人 SCGN / Secretagogin ELISA配对抗体 ELISA
TUG 英文名称: 腺泡状软组织肉瘤结构域蛋白ASPC抗体 0.2ml
CEND1 英文名称: 细胞周期通道和神经细胞分化蛋白1抗体 0.2ml
Anti-CD68 CD68抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Salmonella enteritidis H 英文名称: 伤寒沙门氏菌鞭毛抗原H抗体 0.2ml
ETS1 英文名称: Ets转录因子家族ets1抗体 0.1ml
蛋白激酶A抗体 Anti-PKA 0.1ml
Anti-STAT4 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌决定因子Myf5抗体 规格 0.1ml
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受体α-4(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
丙酮酸(PA)含量测试盒说明书溴氯酚蓝钠盐升麻素蛋白质转印印迹膜丽春红(Ponceau S)染色试剂盒
溴酚蓝钠盐类叶升麻苷丽春红(Ponceau S)溶液
溴酚红钠异类叶升麻苷组化HRP-TMB底物显色试剂盒
硬脂酸丁酯(>98%,BR)松果菊苷印迹HRP-TMB底物显色试剂盒
C10E6,10%溶液5-O-甲基维斯阿米苷印迹超敏型HRP-TMB底物显色试剂盒
C12E10,10%溶液异土木香内酯组化超敏型HRP-TMB底物显色试剂盒
C12E9, 10%溶液盐酸药根碱通用型HRP-AEC底物显色试剂盒
无水氯化钙(>96%,Tech Grade)白屈菜红碱增强型HRP-AEC底物显色试剂盒