其他品牌 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
规格:10mL
货号:YS-02X10334
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于细胞而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
Mouse IgA/FITC 荧光素标记兔抗小鼠IgA抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh 5-HTR3 5-羟色胺受体3抗体 规格 0.1ml
Mouse rat IgG/FITC FITC标记的小鼠抗大鼠IgG 0.3ml
GAS 6 英文名称: 生长停滞特异性蛋白6抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh PTOP 肾上腺皮质发育异常同源蛋白抗体 规格 0.2ml
TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人细胞间粘附分子1Multi-class antibodies规格: 48T
GRM5/mGluR5 促代谢型谷受体5抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMS21/NSE2 E3连接酶MMS21蛋白抗体 规格 0.2ml
ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素转化酶 96T
RNF40 英文名称: 环指蛋白40抗体 0.2ml
CD47 英文名称: 整合素相关蛋白CD47 0.1ml
GRM5/mGluR5 促代谢型谷受体5抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Biotin/PE PE标记的兔抗生物素抗体IgG 0.1ml
GPR58 英文名称: G蛋白偶联受体58抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACE1/CD143 血管紧张素转换酶ACE1抗体 规格 0.1ml
Mfn1/FITC 荧光素标记线粒体融合蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗亲和素 规格 0.1ml
TNFAIP1/FITC 荧光素标记坏死因子α诱导蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
含100mL酶解缓冲液;胰蛋白酶-EDTA琥珀酸待测样品处理试剂盒20次Super Script Ⅱ阴性逆转录酶
食物纤维素比色法定量检测试剂盒20次水杨酸
海鲜食物海藻糖比色法定量检测试剂盒20次4-氯-3,5-二甲酸
蜂蜜海藻糖比色法定量检测试剂盒20次乙酸苄酯
蘑菇海藻糖比色法定量检测试剂盒20次20(S)-原人参三醇
制备海藻糖比色法定量检测试剂盒20次BOC-Nim-苄基-L-组
通用型总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒20次D-丝
食物总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒20次DL-高丙
植物总淀粉生物酶比色法定量检测试剂盒20次新霉素硫酸盐
通用型总淀粉化学比色法定量检测试剂盒20次2-硫代酸
食物总淀粉化学比色法定量检测试剂盒20次氟化钠
植物总淀粉化学比色法定量检测试剂盒20次原钒酸钠
植物木糖比色法定量检测试剂盒20次钨酸钠
培养液木糖比色法定量检测试剂盒20次3-甲基环己醇
酒类尿素比色法定量检测试剂盒20次西红花苷-I
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。