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产品名称 | NAD激酶(NADK)测试盒 |
测定方法 | 微量法、可见分光光度法 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
货号 | YS-01J6322 |
商品介绍:
测定意义
NADK(EC 2.7.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。
测定原理
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH;NADPH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT),通过在600 nm下测定MTT的还原速度(吸光值的变化)可反映出NADK活性的大小。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
性能:
1. 灵敏度:检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
运输:泡沫箱加冰运输,全国各地快递免费送货上门。
存储方式:频繁使用时储存于2~8℃保鲜冷藏,较长时间不用时储存于-20℃,切勿冷冻。
保质期限:有效期6个月,日期、有效期、批号见外包装。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
Arginase II 酶2抗体 总状毛霉
AKR1C3 醛固酮还原酶家族1成员C3抗体 多型孢毛霉
ACTHR 促肾上腺皮质激素受体 丝球毛霉
AGRP 褐黑素相关蛋白ART抗体 球孢毛霉
Adrenodoxin 肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体 直立毛霉
Adracalin Allgrove综合征相关蛋白抗体 两型孢毛霉
AAV5 capsid protein VP1 腺相关病毒5 VP1抗体 卷枝毛霉
ALDH3A2 脂肪醛脱氢酶抗体 生香毛霉
AVPR1A 抗利尿激素1A抗体 葡酒色被孢霉
AVPR1B 抗利尿激素受体1B抗体 拉曼被孢霉
ARFGEF2 二磷酸腺苷核糖基化因子酸交换因子2抗体 多头被孢
ATBF1 α增强子结合蛋白1抗体 小被孢霉
ATXN10 脊髓小脑共济失调10抗体 深黄被孢霉
AKAP7 蛋白激酶A锚定蛋白7抗体 红曲霉菌
ABCA12 腺苷三磷酸结合盒转运体12抗体 红色红曲霉
ABCB9 腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体 玉蜀黍长蠕孢
CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系 其它
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它
SF9, 昆虫卵巢细胞 其它
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human
HET-1A, 人食管上皮细胞 Human
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 Mouse
GC-1, 鼠精原细胞 Mouse
293A,人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别) Human
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 Human
293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 Human
EPC, 大鼠血管内皮祖细胞 Rattus
HBE, 正常人支气管上皮细胞系 Human
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞 Human
HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系 Human
HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 Human
HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 Human
LX-2, 人肝星形细胞株 Human
NAD激酶(NADK)测试盒3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 Mouse
C2C12, 小鼠肌原细胞 Mouse
细胞名称 种属
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人乳腺癌细胞 Human
MDA-MB-231(ATCC来源), 人乳腺癌细胞 Human
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存