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经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 小鼠淋巴瘤细胞;EL4培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 EL4是从用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中诱导的淋巴瘤中建立的。能抗0.1mM 氢化可,对20 μg/ml PHA敏感。 还有一个亚株(EL4.IL-2)可以生成高水平的IL-2。鼠痘病毒阴性。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,2-3天传一代
传代情况 C267
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色
小鼠淋巴瘤细胞;EL4培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 荧光素标记抗磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
胰高血糖素样肽-1抗体 Anti-GLP-1 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗IgG 0.1ml
FOLR2 英文名称: 胎盘叶酸受体蛋白2抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr477) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM 兔抗羊IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
PKB (Rat) 大鼠蛋白激酶BMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体 规格 0.2ml
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白j链 96T
SPOP 英文名称: SPOP蛋白抗体 0.2ml
CCKBR 英文名称: 促胃泌素受体抗体 0.1ml
Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生长因子受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
sTRAIL(Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand) ELISA KIT 人可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体 96T
MDM2BP 英文名称: 双微体2癌基因结合蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO21 F-box蛋白21抗体 规格 0.2ml
IL-2sR Beta ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受体β链Multi-class antibodies规格: 48T
ANKRD6 英文名称: 锚蛋白重复域6抗体 0.1ml
Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-EV71/FITC 荧光素标记肠道病毒71型/手足口病病毒抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-NADPH/FITC 荧光素标记抗NADPH氧化酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C17orf74 17号染色体开放阅读框74抗体 规格 0.2ml
BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 癌易感基因2抗原 0.5mg
H1N1 Hemagglutinin 2 英文名称: 甲型流感病毒血凝素抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh ROM1 视网膜感光细胞外节膜蛋白1抗体 规格 0.2ml
Anti-NADPH/FITC 荧光素标记抗NADPH氧化酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml