服务流程：

接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

自备物品：

15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

比色皿：用于比色的容器

96孔酶标板：用于比色的容器

分光光度仪：用于比色分析

酶标仪：用于微量样品比色分析

储存条件：

14℃或－20℃

准备物品

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

定量PCR方法：

a、竞争法

选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。

b、内参照法

在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。

c、PCR－ELISA法

利用di高辛或等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。

操作程序：

由您提供该实验中目的基因的相关资料（如：基因名称、序列等信息），我们共同探讨服务的可能性和技术路线；

商定服务收费、付款方式、服务期限等，并签定技术服务合同。

有您提供实验所需的足够量的实验样本（100mg组织或107个细胞），本公司不接受您提供的RNA样本

PCR所需引物/探针（如果用探针法），可以由您自己提供，也可以委托本公司设计合成（费用另计）。如果由您自己提供，必须是PAGE纯化的高质量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探针。

我们进行RNA抽提、RNA定量、反转录、Real-time PCR扩增、数据分析。

提供实验报告，包括实验过程、所用仪器试剂、扩增曲线、标准曲线和相关分析数据等。

使用方法：

一、样品采集：

1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。

2、血液样品：用抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。

3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。

4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。

二、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）

1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用

6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
舒缓激肽增效剂C  ≥100% (HPLC)乙酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 稳定剂, 98%大鼠胆囊收缩/肠促胰肽(CCK)免疫试剂盒

S-苄基-L-半胱氨甲酯盐盐 98%D(+)-松二糖 98%大鼠乙酰转移(ChAT)免疫试剂盒

L-4-氨 98%D(+)-松二糖 分析标准品大鼠胆固酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒

L-半胱氨乙酯盐盐 98%1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-O-三甲磺酰-β-D-吡喃甘露糖 98%大鼠胆固24S-羟化(CYP46)免疫试剂盒

N-苄氧羰基-L-天冬氨  99%三-O-苄基-D-葡萄烯糖 98%大鼠胆固(CH)免疫试剂盒

N-苄氧羰基-L-缬氨 99%2,3,4,6-四苄基-D-吡喃葡萄糖 97%大鼠单核趋化蛋白4(MCP-4)免疫试剂盒

L-半胱氨甲酯盐盐 98%2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫酯 98%大鼠单核趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒

2--L-氨 98.5%阿糖尿 98%大鼠单核趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫试剂盒

6-并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六磷酯 98% 牡荆-2-O-鼠李糖 分析标准品，≥98%大鼠单核趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒

L-胱氨 99%D-木糖 超纯级, ≥99%大鼠单氧化(MAO)免疫试剂盒

N-苄氧羰基-L-亮氨 96%木聚糖 90%大鼠大内皮1免疫试剂盒

N-苄氧羰基-L-氨 98%5-溴-4-3吲哚基β-D 半乳糖 99%大鼠催乳(PRL)免疫试剂盒

L-瓜氨 98%L-(−)-木糖 99%大鼠催产(OT)免疫试剂盒

6--1-羟基并三氮唑 98%烯 AR,>99%(GC)，包含180-200 ppm MEHQ 稳定剂大鼠促胰液/胰泌(Sct)免疫试剂盒

2--N-琥珀酰亚基碳酯 98%甲基烯烯酯, 包含50-185 ppm MEHQ稳定剂, 98%大鼠促性腺激抑制激(GnIH)免疫试剂盒
DNA扩增试剂盒48T大鼠抗内膜抗体（EMAb）ELISA试剂盒,6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉 盐盐环磷鸟抗体

大鼠低密度脂蛋白免疫复合物（LDL-IC）ELISA试剂盒,6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉 盐盐内皮因子维生B12受体抗体

大鼠白介10（IL-10）ELISA试剂盒,6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氢异喹啉 盐盐原癌基因cMAF抗体

O/F培养基（HLGB）5-溴基异萘18号染色体开放阅读框56抗体

Oxford Agar Base（SN标准）5-溴基异萘3号染色体开放阅读框22抗体

党参炔 Lobetyolin5-溴基异萘19号染色体开放阅读框46抗体

2-deacetyl wilformine 2-deacetyl wilformine(S)-(+)-1,2,3,4-四氢-1-萘原癌基因cMAF抗体

2′-脱氧胸-5′-三磷三钠盐(S)-(+)-1,2,3,4-四氢-1-萘电压依赖性钙通道Cav2.1抗体