人骨髓造血干细胞
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参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-04-21 16:51:59
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供货周期:现货;规格:5×105cells/T25细胞培养瓶;主要用途:仅供科研实验;组织来源:骨髓组织;
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供货周期
现货
规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途
仅供科研实验
组织来源
骨髓组织
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

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产品名称

规格

组织来源

人骨髓造血干细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

骨髓组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。造血干细胞具有自我更新能力并能分化为各种血细胞的前提细胞,终生成各种血细胞成分,包括红细胞,白细胞和血小板。造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下,造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的生理平衡的角色。临床治疗中,造血干细胞移植广泛应用于血液系统疾病以及自身免疫疾病,在其它实体瘤的治疗中,比如淋巴瘤,生殖细胞瘤,乳腺癌,小细胞肺癌,主要应用于常规治疗失败或复发难治以及具有不良预后因素的患者。造血干细胞以不对称有丝分裂方式进行增殖,一个干细胞分裂产生两个子细胞,一个分化为造血祖细胞,另一个则保持干细胞特征。造血干细胞在不断体外培养产生大量造血祖细胞同时,保持自己既不增殖也不分化。体外培养微环境合适,造血干细胞可持续维持培养 60 天左右。 造血干细胞体外增殖培养需要基质细胞滋养(滋养层细胞),缺少滋养层细胞不增殖,无法长期培养,本产品为收集培养好的造血干悬浮细胞灌装发货,不包含滋养层,因此收货后建议尽快实验。

5.方法简介:

实验室分离的采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  悬浮

细胞形态  圆形

传代特性  不建议传代

消化液  

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

脱氢激亚型2抗体 皮肤T细胞淋巴瘤相关抗原5封闭多肽 

促肾上腺皮质激释放因子/促肾上皮质激释放激抗体 SYF2蛋白封闭多肽 

D型多巴色脱羧抗体 突触相关蛋白23封闭多肽 

CD10单克隆抗体 9号染色体开放阅读框66封闭多肽 

二酰基甘油酰基转移2样蛋白6抗体 组胺鸡卵白蛋白偶联物 

促甲状腺受体抗体(C端) 乙酰基转移10封闭多肽 

核自身抗原SP140抗体 原癌基因AF4蛋白封闭多肽 

SAPS结构域家族3抗体 酪氨羟化封闭多肽 

钠离子/氢离子交换蛋白3抗体 RNA结合蛋白35A封闭多肽 

ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗体 过氧化物体生成蛋白5相关蛋白封闭多肽 

Cy3标记小鼠抗人CD8单克隆抗体 延胡索酰乙酰乙水解封闭多肽 

还原型辅Ⅱ氧化5/腺嘌呤二核苷磷抗体 轴突蛋白5封闭多肽 

舞蹈症相关蛋白40/8相关蛋白/第八因子相关蛋白抗体 重组小鼠FcRn蛋白 

早老蛋白-1抗体 卵泡刺激结合蛋白1封闭多肽 

eIF4H蛋白抗体 解旋样转录因子封闭多肽 

乳腺癌易感基因1抗体 富含亮氨重复蛋白48封闭多肽 

退行性精母细胞同源物1抗体 MAGOH蛋白封闭多肽 

DEK癌基因结合蛋白 基质金属-26封闭多肽 
人骨髓造血干细胞GMEM (Glasgows MEM)500mL-

Ham's F-12500mL-

Ham's F-12K(不含L-)500mL-

小鼠子宫成纤维细胞培养基100mL小鼠子宫成纤维细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持小鼠子宫成纤维细胞佳的生长状态。本产品中已包含小鼠子宫成纤维细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠子宫成纤维细胞的体外培养。

SW579 [SW 579; SW-579]细胞专用培养基(DMEM)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持SW579 [SW 579; SW-579]细胞佳的生长状态。本产品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]细胞的体外培养。

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