大鼠肌腱成纤维细胞
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参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-04-21 16:55:59
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供货周期:现货;规格:5×105cells/T25细胞培养瓶;主要用途:仅供科研实验;组织来源:肌腱组织;
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现货
规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途
仅供科研实验
组织来源
肌腱组织
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

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规格

组织来源

大鼠肌腱成纤维细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

肌腱组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自肌腱组织;肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织,便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上,是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分,肌腹由肌纤维构成,色红质软,有收缩能力,肌腱由致密结缔组织构成,色乳白较硬,没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状,阔肌的肌腱阔而薄,呈膜状,又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌,而肌腱即为白肌,分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

5.方法简介:

实验室分离的采用混合胶原消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  成纤维细胞样

传代特性  可传5代左右;3代以内状态佳

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

2型补体受体抗体 磷脂磷2C封闭多肽 

分泌型白细胞抑制因子抗体 FAM29蛋白封闭多肽 

γ-谷氨酰羧化抗体 磷化肿瘤抑制基因P53封闭多肽 

核转录因子NFXL1抗体 11号染色体开放阅读框5封闭多肽 

丝氨tRNA连接抗体 辣椒受体样蛋白1封闭多肽 

黄体激释放激类似物抗体 碳水化合物磺基转移2封闭多肽 

肌球蛋白1F抗体 eIF2B蛋白封闭多肽 

纺锤体样蛋白4抗体 线粒体肌激CKMT封闭多肽 

细胞色cP450 CYP20A1抗体 磷二酯4B封闭多肽 

酰基脱氢很长链抗体 ENGASE蛋白封闭多肽 

细胞周期检测点激2单克隆抗体 SH3BGRL2蛋白封闭多肽 

SGF29蛋白抗体 跨膜蛋白76/TMEM76封闭多肽 

锌指蛋白419抗体 转录因子Ets差异基因5封闭多肽 

脂肪成熟因子1抗体 过氧化氢诱导转录蛋白1封闭多肽 

真核翻译起始因子3A抗体 防御β-132/β-defensin 132封闭多肽 

G蛋白偶联受体150抗体 联会复合体蛋白3封闭多肽 

猪乙脑病毒包膜蛋白抗体 碳水化合物磺基转移5封闭多肽 

肌动蛋白交联蛋白家族7抗体 过氧化物体生物合成因子5封闭多肽 
大鼠肌腱成纤维细胞人食管癌组织源细胞培养基100mL人食管癌组织源细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持人食管癌组织源细胞佳的生长状态。本产品中已包含人食管癌组织源细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于人食管癌组织源细胞的体外培养。

MG-63细胞专用培养基125mL×4MG-63细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持MG-63细胞佳的生长状态。本产品中已包含MG-63细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于MG-63细胞的体外培养。

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