人肠静脉内皮细胞
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人肠静脉内皮细胞

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-04-21 16:55:02
261
属性:
供货周期:现货;规格:5×105cells/T25细胞培养瓶;主要用途:仅供科研实验;组织来源:肠组织;
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产品属性
供货周期
现货
规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途
仅供科研实验
组织来源
肠组织
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自肠静脉;肠道指的是从胃幽门至gang门的消化管。肠是消化管中长的一段,也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经gang门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。

5.方法简介:

实验室分离的采用胰dan白-胶原联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  内皮细胞样

传代特性  可传2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

人肠静脉内皮细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

肠组织

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

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果胶抑制蛋白18抗体 组蛋白H2AZ封闭多肽 

联会复合体蛋白3抗体 丝裂原活化蛋白激磷-2封闭多肽 

溶质载体家族蛋白30成员A9抗体 胶原蛋白9封闭多肽 

抑制A/Inhibin α抗体 甲状旁腺功能亢进蛋白2/细胞分裂周期73封闭多肽 

心肌肌球蛋白重链抗体 Smad蛋白相互作用蛋白1封闭多肽 

生物钟KAT13D蛋白抗体 锌指蛋白ZNF377封闭多肽 

RAS相关GTP结合蛋白A抗体 BTB-kelch蛋白家族4封闭多肽 

内着丝粒蛋白抗体 c-Myc应答蛋白封闭多肽 

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磷化核仁磷蛋白抗体 β淀粉样肽1-16 多肽 

T细胞和嗜性粒细胞表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体 转录因子SOX10封闭多肽 

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ADP核糖基化因子5抗体 转录因子蛋白SIM1封闭多肽 

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操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 


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