大鼠气管上皮细胞
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2023-04-21 16:55:44
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供货周期:现货;规格:5×105cells/T25细胞培养瓶;主要用途:仅供科研实验;组织来源:气管;
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现货
规格
5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途
仅供科研实验
组织来源
气管
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠气管上皮细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

气管

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。

5.方法简介:

实验室分离的采用链霉dan白-中性dan白混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  上皮细胞样

传代特性  可传1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

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实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

整合α3重链抗体 KIAA1530蛋白封闭多肽 

SUSD5蛋白抗体 磷化帕金蛋白封闭多肽 

脂肪转运蛋白5抗体 CD8封闭多肽 

MKX蛋白抗体 重组人骨钙蛋白 

丝裂原活化蛋白激3K9抗体 生长激封闭多肽 

CREB结合蛋白抗体 原钙粘蛋白γ10封闭多肽 

CISD1蛋白抗体 蛋白磷3调节亚基R2封闭多肽 

JmjC结构域组蛋白去甲基化H3-K36抗体 MKLN1封闭多肽 

钙粘蛋白23抗体 肉碱氧位甲基转移封闭多肽 

驱动蛋白家族成员26B抗体 DeltaD封闭多肽 

环指蛋白94抗体 线粒体核糖体蛋白L49封闭多肽 

卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体 滋养层细胞抗原3β-HSD封闭多肽 

脑特异性蛋白BPX抗体 重组人白细胞抗原B蛋白 

SNAPC3蛋白抗体 Rab4相互作用蛋白封闭多肽 

糖皮质激受体(β)抗体 重组白细胞介1受体相关蛋白 

F-box蛋白家族FBXO25抗体 ZC3H15蛋白封闭多肽 

载脂蛋白C2抗体 缺氧诱导基因1蛋白/HIGD1A封闭多肽 

中心体蛋白89抗体 DUS1L蛋白封闭多肽 
大鼠气管上皮细胞SK-OV-3/DDP细胞专用培养基125mL×4SK-OV-3/DDP细胞专用培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持SK-OV-3/DDP细胞佳的生长状态。本产品中已包含SK-OV-3/DDP细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于SK-OV-3/DDP细胞的体外培养。

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