大鼠附睾上皮细胞
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具体成交价以合同协议为准
2023-04-21 16:53:01
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供货周期:现货;规格:5×105cells/T25细胞培养瓶;主要用途:仅供科研实验;组织来源:附睾;
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现货
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5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途
仅供科研实验
组织来源
附睾
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产品简介

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详细介绍

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大鼠附睾上皮细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

附睾

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自附睾组织;附睾(Epididymis)是一个由曲折、细小的管子构成的器官,一端接着输精管(Ductusdeferens),一端接着睾丸(Testis)的曲细精管,具体结构主要包括输出小管和附睾管。附睾紧贴睾丸的上端和后缘,可分为头、体、尾三部。精子离开睾丸后通过输出小管进入附睾。附睾具有暂存精液并分泌附睾液营养精子的功能,以促进精子的进一步成熟附睾的功能是暂存精子,促进精子的进一步成熟。精子在附睾内获得运动能力,总共停留8~17天,终达到功能上的成熟。在这个过程中,精子除了自身的因素,还受到附睾微环境的影响,这包括了一系列的物理、化学变化和精子形态的改变。可以说,附睾微环境正常稳定是附睾发挥促成熟这一功能的必要条件。若附睾的功能发生异常,精子则不能成熟,引起不育。附睾上皮含有主细胞、基细胞、亮细胞等几种类型细胞。基细胞,其顶部离附睾管腔有一定距离,在附睾各部分,其形态没有差别,一般认为是贮备细胞;另一种主细胞,是维持附睾生理功能的物质基础,在各区段的主细胞形态结构差别很大,这也反映出各区段的生理功能的差异。除上皮细胞外,附睾的管壁组织结构也有规律性的变化,附睾管起始段平滑肌有自发地节律性收缩,而尾部平滑肌就没有这种特点,仅在射精一瞬间出现强烈的节律收缩。作为负责提供适合精子成熟微环境的附睾,具有活跃的分泌与吸收功能。其中,附睾上皮的电解质和水分的转运,对保持附睾内合适的离子浓度和suan碱度,为精子成熟提供适宜的环境起着相当重要的作用。睾丸的支持细胞每天能产生大量睾网液,如一只公羊每天约能分泌40毫升睾网液,而从附睾排出的只不过几百微升,也就是说睾丸分泌液有99%被附睾上皮重新吸收回体内。动物实验表明,结扎输精管时睾丸不会肿胀,但若结扎睾丸输出小管,睾丸第二天就会肿胀,这就充分证实了附睾存在着强有力的吸收功能,但是重新吸收的意义尚不清楚。体外培养附睾上皮细胞对精子的发育、成熟,附睾生理基础功能研究具有重要意义。

5.方法简介:

实验室分离的采用胶原消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、EGF、Hydrocortisone、肾上腺素、甲状腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  上皮细胞样

传代特性  可传1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

STAC1蛋白抗体 脂肪水解LIPN封闭多肽 

PSD95结合蛋白1抗体 重组人胎盘生长因子蛋白 

英文名称: GFP 人类疱疹病毒8封闭多肽 

磷化磷脂酰肌醇激/PI3 Kinase P85α/γ抗体 血型糖蛋白A/涎糖蛋白封闭多肽 

磷化视网膜色变性蛋白4抗体 滋养层细胞抗原3β7封闭多肽 

磷化结蛋白抗体 基因抑制元件1封闭多肽 

富含丝氨精子发生相关蛋白2抗体 有丝分裂激B封闭多肽 

HRC蛋白抗体 跨膜蛋白74封闭多肽 

γS-crystallin蛋白抗体 重组核衣壳突变蛋白(D3L,P13T,D103Y,D128Y,H145Y,R203K,G204R,T205I,S235F), His tag, (南非) 

干扰肾细胞癌蛋白2抗体 CD97封闭多肽 

磷脂转移蛋白抗体 肌球蛋白结合蛋白H样蛋白封闭多肽 

去整合样金属28抗体 黑色瘤相关抗原C1封闭多肽 

3-羟基异丁脱氢抗体 GTP激活蛋白ASAP3封闭多肽 

铬细胞瘤患者抑癌基因SDHB抗体 磷化S6核糖体蛋白封闭多肽 

非受体型蛋白酪氨磷7抗体 重组人肾小球细胞粘附分子受体蛋白 

广泛控制氨基合成1样蛋白1抗体 叉头蛋白O3A封闭多肽 

丝氨/精氨相关蛋白53抗体 癫痫相关基因6封闭多肽 

信号肽复合物亚基2抗体 碱性螺旋环螺旋蛋白MESP2封闭多肽 
大鼠附睾上皮细胞大鼠颞下颌关节软骨细胞培养基100mL大鼠颞下颌关节软骨细胞培养基由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持大鼠颞下颌关节软骨细胞佳的生长状态。本产品中已包含大鼠颞下颌关节软骨细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于大鼠颞下颌关节软骨细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。

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