产品名称：人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞荧光素酶标记    

细胞代码：U251MG/TMZ+LUC(3000)

培养条件：DMEM+10%FBS +1%P/S +TMZ

生长状态：贴壁生长

03、细胞培养时能否更换胎牛血清?

首先要确定更换胎牛血清的理由，如果细胞培养无异常的话，不建议随意更换不同品牌和来源的胎牛血清。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的来源(血源地)和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同地域和等级的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞死亡。

如果是使用的胎牛血清出现了问题，比如保存不当或操作不当导致血清成分析出、混浊、污染等情况，可以优先更换同品牌、等级、批次的血清;如果是产品质量问题更换血清品牌的话，需要用一批细胞进行预实验才行，以保证细胞能够正常培养。

另外在购买胎牛血清的时候要选择正规来源和经过海关检疫胎牛血清，非正规来源的胎牛血清有很多安全隐患，对实验室、操作人员、细胞培养、实验数据都有很大的影响。

04、一般在拿到细胞后，应该注意什么?

收到细胞后先不要开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议对收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张)，排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封，出现污染状况一般可以再申请免费发送一株细胞。

收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制。

05、培养细胞什么时候需要换液?

视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。

06、培养基到底要不要加抗生素?

除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。如果是没有进行过细胞培养的新手，对无菌技术没有信心的，或者提取的原代细胞，怕污染的，可以适量添加抗生素。抗生素本身也是有毒性的，有些抗生素的药效浓度水平与毒效浓度水平非常接近，对细胞多少有伤害。

07、培养箱二氧化碳使用比例如何判定?

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5CO2培养细胞。

小鼠肝实质细胞 AML-12

小鼠气道平滑肌细胞 ASMC

小鼠脑神经胶质母细胞 G422

小鼠精原细胞系 GC-1 spg

小鼠主动脉内皮细胞 MAEC

小鼠骨样细胞 MLO-Y4

小鼠肺上皮细胞 MLE-12

小鼠肾脏内髓集合管3上皮细胞 IMCD3

小鼠胚胎成纤维细胞 3T3-L1

小鼠乳腺癌细胞 4T1

小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 4T1+luc

小鼠巨噬细胞 Ana-1

小鼠黑色素瘤细胞 B16

小鼠黑色素瘤细胞 B16-F10

小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 B16-F10+LUC

小鼠原B细胞株 BAF3

小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31

小鼠脑微血管内皮细胞株 bEnd.3

小鼠胰岛素瘤胰岛Beta细胞 Beta-TC-6

小鼠小胶质细胞 BV2

小鼠神经干细胞 C17.2

小鼠成肌细胞 C2C12

小鼠胚胎成纤维细胞 C3H/10T1/2 Clone8  

小鼠结肠癌细胞 CT26

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 CT26+LUC

小鼠结肠癌细胞 CT26.WT

小鼠胚胎干细胞 E14

小鼠淋巴瘤细胞 EL-4

小鼠乳腺癌细胞 EMT6

小鼠胶质细胞瘤 GL-261

小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记 GL-261+luc

小鼠乳腺上皮细胞 HC11

小鼠肝癌细胞 HEPA1-6

小鼠肝癌细胞荧光素酶标记 HEPA1-6+LUC

小鼠海马神经元细胞 HT22

小鼠卵巢上皮癌细胞 ID8

小鼠单核巨噬细胞 J774A.1

小鼠骨肉瘤成骨细胞 K7M2WT (K7M2-wt)

小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌细胞 LLC

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC

小鼠淋巴瘤细胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠成纤维细胞 L929

小鼠胰腺癌细胞 LTPA

小鼠乳腺癌高转移细胞 MA-891

小鼠膀胱癌细胞 MB49

小鼠结肠癌细胞 MC38

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 MC38+LUC

小鼠胚胎成骨细胞 MC3T3-E1

小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 MC3T3-E1subclone 14

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF(霉素C处理)

小鼠前胃癌细胞 MFC

小鼠正常肝细胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469）

小鼠脑神经瘤细胞 neuro-2a

小鼠胚胎细胞 NIH/3T3

小鼠骨髓基质细胞 OP9

小鼠杂交瘤（抗CD2）细胞 OKT11

小鼠畸胎瘤细胞 P19

小鼠白血病细胞 P388

小鼠肥大细胞瘤细胞 P815

小鼠源基于MLV-10A1逆转录病毒包装细胞系 PT-67

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 RAW 264.7

小鼠视网膜神经节细胞 RGC-5

小鼠前列腺癌细胞 RM-1

小鼠杂交瘤 SDOW-17

小鼠骨髓瘤细胞 Sp2/0

小鼠骨髓瘤细胞 Sp2/0-Ag14

小鼠小肠内分泌细胞 STC-1

小鼠肾小球系膜细胞 SV40-MES-13

小鼠淋巴结内皮细胞 SVEC4-10

小鼠睾丸间质细胞 TM3

08、L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?

L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。

09、培养基里的粉红色是什么?

酚红一般作为培养基中pH值的指标：当培养基呈中性时为红色，呈酸性时为黄色，碱性时为紫色。另外，酚红可以模拟类固醇激素(特别是雌激素)的作用。如果要避免类固醇反应，可以在无酚红的培养基里进行培养。

10、胰酶里EDTA的作用?

二价的离子会抑制胰酶活性，所以加入EDTA可以螯合掉Ca、Mg这样的二价离子。胰酶也要注意不要反复冻融。

11、如何避免细胞培养过程中的污染?

主要还是考虑无菌环境，尽量做好操作台的灭菌，别把培养基滴落在生物安全柜的入风口，别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生，那你就只能等着用甲醛熏蒸了。

紫外无法杀灭霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。复苏的时候，水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情况下，选择扔掉。避免交叉感染，要不只能整个实验室消毒了。

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