人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

培养条件：NK-92MI专用培养基

生长特性：悬浮

生长形态：淋巴母细胞样 成团聚集

细胞培养:体外模拟体内需要的生长条件（温度，营养等），然后加上一些处理条件，比如做药物筛选，就可以做抗性基因的表达的筛选，比如还可以测定某个基因敲低或是过表达的产物，这个当然要结合WB来看最后基因的表达产物是否升高哦，细胞培养的应用还有很多~~

细胞培养的基本原理：细胞传代（生存空间和营养不足，长得太密，代谢废物太多，要洗洗，同时也要分离出一部分细胞，要加入新的培养液），换液（生存空间和营养剩余，但是代谢废物太多，要洗洗，要吃饭，才能长好，所以要洗和加入新鲜培养基），冻存（太多了，先存起来，液氮里面里就是低温，保存能量，活得久），复苏（解冻，恢复吃饭的能力，恢复生长。）这四步。

细胞培养的基本步骤（一定要明白每个步骤的意义和目的）：

01细胞传代（贴壁细胞）：试剂：PBS,胰酶，含血清的培养基；流程：显微镜下看一看培养皿里的细胞多不多，太多（80%~90%）会导致代谢废物很多，先吸掉废液，再用PBS洗一洗，同时太多会导致细胞黏在一起，这时候就需要加点胰酶消除它们之间的粘性，是否消除完，在显微镜下看一看，看完加入适宜的含血清的培养基，中和一下胰酶，这叫吹打，除此之外，细胞太多了，把一部分细胞移出来，加入适量的培养基放入孵箱继续培养，这叫传代。02细胞换液：试剂：PBS，含血清的培养基；流程：先吸掉代谢废物（即细胞瓶中的培养液），再用PBS洗一洗，由于细胞长得不是很多，细胞之间没有黏在一起，因此不需要加入胰酶来消除它们之间的粘性。由于细胞要吃饭，加入新鲜的含血清的培养基，最后放到孵箱里面进行培养。

03细胞冻存：试剂：冻存液，PBS，胰酶，含血清的培养基；流程：要冻存，先配置冻存液，冻存液包含了：DMSO：防止在低温（零度以下至-196℃）保存细胞时，细胞内液会形成冰晶，渗透压会发生改变，细胞结构会出现紊乱，会导致细胞出现损伤。冻存液制备时，一般需与血清一起配置：因为两者互融时，会散发热量，所以冻存液需提前制备。因为细胞太多了，需要冻存，所以要先看一看，吸一吸，洗一洗，分一分，中和一下，吹打制成细胞悬液，离心，吸掉上清液，加入冻存液，轻轻吹吸均匀，每管等量1ml装入冻存管，4℃20min,-20℃30min,-80℃过夜，最后放入液氮罐。04细胞复苏：试剂：含血清的培养基；流程：从液氮中取出冻存管，迅速（小于3min）置于37℃水浴锅中，解冻时，边晃动边观察，当看到只有一小块冰存在时，即可从水浴锅中取出，打开冻存管，迅速将细胞悬液吸到离心管中，轻轻混匀，1000r/min,离心五分钟，吸掉上清液，沉淀中加入适量培养液，放入孵箱中，培养。还有就是：复苏的细胞，需要在24小时后，换一次培养液。最后：在这里特别感谢B站上无私分享的细胞培养的视频资源，正是你们的分享，帮助了我，我也会继续把我学到的继续分享，帮助更多的人！如果大家想要获得这份视频资源的话，可以在后台私聊小编获取哦，里面关于细胞培养的知识讲解的超级详细！明天我会继续介绍细胞培养的一些注意事项以及WB的操作的步骤和原理。最后，如果觉得我的推文对你有用的话，请点个关注哦！

细胞培养:体外模拟体内需要的生长条件（温度，营养等），然后加上一些处理条件，比如做药物筛选，就可以做抗性基因的表达的筛选，比如还可以测定某个基因敲低或是过表达的产物，这个当然要结合WB来看最后基因的表达产物是否升高哦，细胞培养的应用还有很多，欢迎大家在后台留言。

细胞培养的基本原理：细胞传代（生存空间和营养不足，长得太密，代谢废物太多，要洗洗，同时也要分离出一部分细胞，要加入新的培养液），换液（生存空间和营养剩余，但是代谢废物太多，要洗洗，要吃饭，才能长好，所以要洗和加入新鲜培养基），冻存（太多了，先存起来，液氮里面里就是低温，保存能量，活得久），复苏（解冻，恢复吃饭的能力，恢复生长。）这四步。

GBC-SD 人胆囊癌细胞

JEKO-1 人套细胞淋巴癌细胞

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mp38

nci-h226 人肺鳞癌细胞

hepg2.2.15 人肝癌细胞

SK-BR-3 人乳腺腺癌细胞

SNU-1 人胃癌细胞

su-dhl-6 人B细胞淋巴瘤细胞

HL-60 人早幼粒急性白血病细胞株

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nci-h209 人小细胞肺癌细胞

sk-hep-1 人肝癌细胞

sw579 人甲状腺鳞癌细胞

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bt474 人乳腺导管癌细胞

ncm460 人正常结肠上皮细胞

hmec-1 人微血管内皮细胞

mrc5 人胚肺细胞株

t2 (atcc) 人T2细胞

22rv1 人前列腺癌细胞

hct8 人结直肠腺癌细胞

786-o 人肾透明细胞腺癌细胞

SKOV3-GFP 转染GFP的人卵巢癌细胞

RKO 人结肠癌细胞

calu-1 人肺癌细胞

kb 人口腔表皮样癌细胞

ovcar3 人卵巢腺癌细胞

u937-dc-sign 人组织细胞淋巴瘤细胞

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u2OS 人成骨肉瘤细胞

h69ar 人小细胞肺癌细胞

sk-mel-28 人皮肤恶性黑色素瘤

人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞

95D 人高转移肺癌细胞

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C666-1 人鼻咽癌细胞

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ASPC-1 人胰腺癌细胞

TT 人髓样甲状腺肿瘤细胞

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H9胚胎干细胞 人胚胎干细胞

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SMMC7721 人肝癌细胞

RL95-2 人子宫内膜癌细胞

H520 人小肺癌细胞

peo(peo1) 人卵巢癌细胞

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mhcc-97L 人肝癌细胞(低转移)

mhcc-97H 人肝癌细胞(高转移)

huh7.5 人肝癌细胞

jeg3 人绒毛膜癌细胞

hutu80 人十二指肠腺癌细胞

DAMI 人巨核细胞白血病细胞

HEL 人红白细胞白血病细胞

hFOB 1.19 人SV40转染成骨细胞

NCI-H524 人非小细胞肺癌细胞

NCI-H1264（H157） 人肺鳞状细胞癌细胞

NCI-H358 人非小细胞肺癌细胞

PLC/PRF/5 人肝癌细胞

BHT101 人甲状腺癌细胞

T-47D 人乳腺管癌细胞

A172 人胶质母细胞瘤细胞

ACHN 人肾细胞腺癌细胞

ARPE-19 人视网膜色素上皮细胞

AV3 人宫颈癌细胞

BT-549 人乳腺导管癌细胞

CAOV-3 人卵巢腺癌细胞

CoC1 人卵巢癌细胞

HCC827 人非小细胞肺癌细胞

Hep 3B2.1-7 [Hep 3B, Hep-3B, Hep3B] 人肝癌细胞

HPAC 人胰腺癌细胞

HT-1376 人膀胱癌细胞

JAR 人胎盘绒毛癌细胞

KNS-89 人脑胶质细胞瘤细胞

LN229 人胶质瘤细胞

LNCaP clone FGC 人前列腺癌细胞

MDA-KB2 人乳腺细胞

MDA-MB-361 人乳腺癌细胞

MET-5A 人膜间皮细胞

MGC-803 人胃癌细胞

NCI-H1650 [H-1650, H1650] 人肺支气管癌细胞

RT4 人膀胱移行细胞乳头瘤

SK-N-MC 人神经上皮瘤细胞

SK-N-SH 人神经母细胞瘤细胞

SW 982 [SW-982, SW982] 人滑膜肉瘤细胞

T98G 人胶质母细胞瘤

U251 MG 人类星形胶质细胞瘤细胞

U266 人骨髓瘤细胞

VCAP 人前列腺癌细胞

hTERT-HPNE 人胰腺导管细胞

KYSE30 人食管鳞癌细胞

SCC9 人口腔鳞癌细胞

HTR8-SVNEO 人绒毛膜滋养层细胞

LS174T 人结直肠腺癌细胞

TU212 人咽喉磷癌细胞

CCRF-CEM 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞

RPMI8226 人多发性骨髓瘤细胞

panc10.05 人胰腺癌细胞

nalm-6 人前B急性淋巴细胞白血病细胞

UM-CHOR1 人斜坡脊索瘤细胞

MKN-28 人腺癌

DAUDI 人Burkitt's淋巴瘤细胞

WRL68 人正常肝细胞

HCC1937 人乳腺癌细胞

HFL1 人胚肺成纤维细胞

NCCIT 人畸胎癌细胞

HCT-15 人结肠癌细胞

SC SC人外周血单核巨噬细胞

caski 人宫颈癌上皮细胞

snu-16 人细胞

ME-180  人子宫颈表皮癌细胞

MS751 人子宫颈表皮癌细胞

SW1990 人胰腺癌细胞

hsf 人永生化真皮成纤维细胞

细胞培养的基本步骤（一定要明白每个步骤的意义和目的）：

01细胞传代（贴壁细胞）：试剂：PBS,胰酶，含血清的培养基；流程：显微镜下看一看培养皿里的细胞多不多，太多（80%~90%）会导致代谢废物很多，先吸掉废液，再用PBS洗一洗，同时太多会导致细胞黏在一起，这时候就需要加点胰酶消除它们之间的粘性，是否消除完，在显微镜下看一看，看完加入适宜的含血清的培养基，中和一下胰酶，这叫吹打，除此之外，细胞太多了，把一部分细胞移出来，加入适量的培养基放入孵箱继续培养，这叫传代。02细胞换液：试剂：PBS，含血清的培养基；流程：先吸掉代谢废物（即细胞瓶中的培养液），再用PBS洗一洗，由于细胞长得不是很多，细胞之间没有黏在一起，因此不需要加入胰酶来消除它们之间的粘性。由于细胞要吃饭，加入新鲜的含血清的培养基，最后放到孵箱里面进行培养。

03细胞冻存：试剂：冻存液，PBS，胰酶，含血清的培养基；流程：要冻存，先配置冻存液，冻存液包含了：DMSO：防止在低温（零度以下至-196℃）保存细胞时，细胞内液会形成冰晶，渗透压会发生改变，细胞结构会出现紊乱，会导致细胞出现损伤。冻存液制备时，一般需与血清一起配置：因为两者互融时，会散发热量，所以冻存液需提前制备。因为细胞太多了，需要冻存，所以要先看一看，吸一吸，洗一洗，分一分，中和一下，吹打制成细胞悬液，离心，吸掉上清液，加入冻存液，轻轻吹吸均匀，每管等量1ml装入冻存管，4℃20min,-20℃30min,-80℃过夜，最后放入液氮罐。04细胞复苏：试剂：含血清的培养基；流程：从液氮中取出冻存管，迅速（小于3min）置于37℃水浴锅中，解冻时，边晃动边观察，当看到只有一小块冰存在时，即可从水浴锅中取出，打开冻存管，迅速将细胞悬液吸到离心管中，轻轻混匀，1000r/min,离心五分钟，吸掉上清液，沉淀中加入适量培养液，放入孵箱中，培养。还有就是：复苏的细胞，需要在24小时后，换一次培养液。最后：在这里特别感谢B站上无私分享的细胞培养的视频资源，正是你们的分享，帮助了我，我也会继续把我学到的继续分享，帮助更多的人！如果大家想要获得这份视频资源的话，可以在后台私聊小编获取哦，里面关于细胞培养的知识讲解的超级详细！明天我会继续介绍细胞培养的一些注意事项以及WB的操作的步骤和原理。